CAJ | 학술논문

背景与目的:无血清饥饿方法可以诱发细胞自噬,同时也可以引起细胞周期阻滞.虽然研究者们对细胞自噬与细胞周期已经进行了深入的研究,但是对于两者之间的关系还是知之甚少.本研究旨在通过研究细胞周期素(Cyclin)在饥饿诱导的细胞发生自噬时表达的变化,来探讨自噬对细胞周期的影响.方法:对照组:d-Hanks液代替培养基饥饿诱导处于对数生长期的HeLa细胞,收获饥饿0、3、6、12 h的细胞.实验组:用d-Hanks液开始饥饿的同时加入3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),收获饥饿0、3、6、12 h的细胞,用流式细胞术和Western blot法检测细胞周期素和特异性标记自噬的兔抗人微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC-3).结果:饥饿3 h对照组HeLa细胞中有LE-3表达,并随饥饿时间延长而逐渐增加.Cyclin E、Cyclin D3在饥饿3 h开始减少,在饥饿6 h降低至最低水平,而Cyclin A、Cyclin B1在饥饿6 h开始下降.实验组HeLa细胞在饥饿3 h时LC-3的表达水平较低,随饥饿时间的延长LC-3表达基本不变化,Cyclin D3、Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B1表达的下降速度也较对照组减慢.结论:自噬参与饥饿诱导的Cyclin降解的水解过程,Cyclin D3、Cyclin E水解比Cyclin A、Cyclin B1出现早,降解速度快.
배경여목적:무혈청기아방법가이유발세포자서,동시야가이인기세포주기조체.수연연구자문대세포자서여세포주기이경진행료심입적연구,단시대우량자지간적관계환시지지심소.본연구지재통과연구세포주기소(Cyclin)재기아유도적세포발생자서시표체적변화,래탐토자서대세포주기적영향.방법:대조조:d-Hanks액대체배양기기아유도처우대수생장기적HeLa세포,수획기아0、3、6、12 h적세포.실험조:용d-Hanks액개시기아적동시가입3-갑기선표령(3-methyladenine,3-MA),수획기아0、3、6、12 h적세포,용류식세포술화Western blot법검측세포주기소화특이성표기자서적토항인미관상관단백1경련3 Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC-3).결과:기아3 h대조조HeLa세포중유LE-3표체,병수기아시간연장이축점증가.Cyclin E、Cyclin D3재기아3 h개시감소,재기아6 h강저지최저수평,이Cyclin A、Cyclin B1재기아6 h개시하강.실험조HeLa세포재기아3 h시LC-3적표체수평교저,수기아시간적연장LC-3표체기본불변화,Cyclin D3、Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B1표체적하강속도야교대조조감만.결론:자서삼여기아유도적Cyclin강해적수해과정,Cyclin D3、Cyclin E수해비Cyclin A、Cyclin B1출현조,강해속도쾌.