CAJ | 학술논문

为了得到一种简便的从动物组织中分离纯化透明质酸(HA)的新方法,用牛眼玻璃体为原料,对HA的分离纯化进行了研究.在ρ(NaHCO3)=7.56 g/L和ρ(Na2CO3)=1.06 g/L的碱性缓冲水溶液中,用胰蛋白酶水解牛眼HA提取物中的蛋白质,经氯苯除杂后,用乙醇析出并分离得到HA初级沉淀物,将其溶解于ρ(NaCl)=11.6 g/L,ρ(NaH2PO4 · 12H2O)=0.45 g/L,ρ(Na2HPO4 · 2H2O)=0.06 g/L的含盐磷酸盐水溶液中,再用3倍体积的乙醇析出并分离得到HA的首次纯化沉淀物,此纯化阶段分离系数(α)=19.03,蛋白质和HA中w(HA)=63.9%,HA回收率91.84%.其次,用含盐磷酸盐水溶液溶解HA的首次纯化沉淀物,再加入ρ(活性炭)=50 g/L及ρ(高岭土)=100 g/L进行吸附纯化,此纯化阶段分离系数(α)=27.69,HA回收率94.0%,w(DNA)=0%,蛋白质和HA中w(HA)=98.0%.最后,经50 000 Da透析袋用去离子水透析4 h,用乙醇析出并分离得到纯化了的HA沉淀,此纯化阶段分离系数(α)=17.64,HA回收率93.5%.最终HA沉淀经冷冻干燥后获白色粉末状HA纯化品,无水HA纯化品中w(HA)=99.77%,HA相对分子质量Mη=6.3×105.该方法牛眼玻璃体质量扩大至2 000 mL的扩试结果与小试结果相近.该文报道工作的新颖性,已为2007年4月18日由陕西省科学技术信息研究所查新中心出具的第2007360-3号<科技查新报告>所证实.
위료득도일충간편적종동물조직중분리순화투명질산(HA)적신방법,용우안파리체위원료,대HA적분리순화진행료연구.재ρ(NaHCO3)=7.56 g/L화ρ(Na2CO3)=1.06 g/L적감성완충수용액중,용이단백매수해우안HA제취물중적단백질,경록분제잡후,용을순석출병분리득도HA초급침정물,장기용해우ρ(NaCl)=11.6 g/L,ρ(NaH2PO4 · 12H2O)=0.45 g/L,ρ(Na2HPO4 · 2H2O)=0.06 g/L적함염린산염수용액중,재용3배체적적을순석출병분리득도HA적수차순화침정물,차순화계단분리계수(α)=19.03,단백질화HA중w(HA)=63.9%,HA회수솔91.84%.기차,용함염린산염수용액용해HA적수차순화침정물,재가입ρ(활성탄)=50 g/L급ρ(고령토)=100 g/L진행흡부순화,차순화계단분리계수(α)=27.69,HA회수솔94.0%,w(DNA)=0%,단백질화HA중w(HA)=98.0%.최후,경50 000 Da투석대용거리자수투석4 h,용을순석출병분리득도순화료적HA침정,차순화계단분리계수(α)=17.64,HA회수솔93.5%.최종HA침정경냉동간조후획백색분말상HA순화품,무수HA순화품중w(HA)=99.77%,HA상대분자질량Mη=6.3×105.해방법우안파리체질량확대지2 000 mL적확시결과여소시결과상근.해문보도공작적신영성,이위2007년4월18일유합서성과학기술신식연구소사신중심출구적제2007360-3호<과기사신보고>소증실.