中华肿瘤防治杂志
中華腫瘤防治雜誌
중화종류방치잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER PREVENTION AND TREATMENT
2007年
24期
1864-1867
,共4页
DNA,催化性%癌,肝细胞/病理学%基因表达%基因型%转染
DNA,催化性%癌,肝細胞/病理學%基因錶達%基因型%轉染
DNA,최화성%암,간세포/병이학%기인표체%기인형%전염
目的:本研究针对甲胎蛋白mRNA(AFP mRNA)设计脱氧核酶(DZ),观察其切割AFP mRNA的有效性,探索脱氧核酶在肝癌基因治疗的可能性.方法:体外转录AFP mRNA底物,设计并合成DZ、硫代修饰脱氧核酶(DZs,序列同DZ,但两侧各有两个脱氧核苷酸进行了硫代修饰)、反义寡聚脱氧核苷酸(ASO)、无关DZ对照.体外切割AFP mRNA;经转染试剂将DZ转染入肝癌细胞HepG2,利用RT-PCR法检测AFP mRNA水平的变化;免疫细胞化学及图像分析系统检测AFP蛋白质表达情况;MTT法初步估计肝癌细胞的生长效应.结果:DZ与DZs在体外均可切割AFP mRNA底物,其切割率分别为63.2%与60.9%;经转染DZ、DZs的细胞均下调AFP mRNA的水平,而且DZs的作用更强;经转染DZ与DZs的细胞均下调AFP的表达,ASO也略下调AFP的表达;DZ、DZs有抑制细胞生长的作用.结论:本实验设计的DZ能在细胞外有效切割AFP mRNA;在细胞内也能切割AFP mR-NA、抑制AFP的表达、抑制肝癌细胞的生长,为肝癌的基因治疗提供可能性.
目的:本研究針對甲胎蛋白mRNA(AFP mRNA)設計脫氧覈酶(DZ),觀察其切割AFP mRNA的有效性,探索脫氧覈酶在肝癌基因治療的可能性.方法:體外轉錄AFP mRNA底物,設計併閤成DZ、硫代脩飾脫氧覈酶(DZs,序列同DZ,但兩側各有兩箇脫氧覈苷痠進行瞭硫代脩飾)、反義寡聚脫氧覈苷痠(ASO)、無關DZ對照.體外切割AFP mRNA;經轉染試劑將DZ轉染入肝癌細胞HepG2,利用RT-PCR法檢測AFP mRNA水平的變化;免疫細胞化學及圖像分析繫統檢測AFP蛋白質錶達情況;MTT法初步估計肝癌細胞的生長效應.結果:DZ與DZs在體外均可切割AFP mRNA底物,其切割率分彆為63.2%與60.9%;經轉染DZ、DZs的細胞均下調AFP mRNA的水平,而且DZs的作用更彊;經轉染DZ與DZs的細胞均下調AFP的錶達,ASO也略下調AFP的錶達;DZ、DZs有抑製細胞生長的作用.結論:本實驗設計的DZ能在細胞外有效切割AFP mRNA;在細胞內也能切割AFP mR-NA、抑製AFP的錶達、抑製肝癌細胞的生長,為肝癌的基因治療提供可能性.
목적:본연구침대갑태단백mRNA(AFP mRNA)설계탈양핵매(DZ),관찰기절할AFP mRNA적유효성,탐색탈양핵매재간암기인치료적가능성.방법:체외전록AFP mRNA저물,설계병합성DZ、류대수식탈양핵매(DZs,서렬동DZ,단량측각유량개탈양핵감산진행료류대수식)、반의과취탈양핵감산(ASO)、무관DZ대조.체외절할AFP mRNA;경전염시제장DZ전염입간암세포HepG2,이용RT-PCR법검측AFP mRNA수평적변화;면역세포화학급도상분석계통검측AFP단백질표체정황;MTT법초보고계간암세포적생장효응.결과:DZ여DZs재체외균가절할AFP mRNA저물,기절할솔분별위63.2%여60.9%;경전염DZ、DZs적세포균하조AFP mRNA적수평,이차DZs적작용경강;경전염DZ여DZs적세포균하조AFP적표체,ASO야략하조AFP적표체;DZ、DZs유억제세포생장적작용.결론:본실험설계적DZ능재세포외유효절할AFP mRNA;재세포내야능절할AFP mR-NA、억제AFP적표체、억제간암세포적생장,위간암적기인치료제공가능성.
