微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2007年
5期
43-46
,共4页
初兆娴%孟宪志%桓明辉%陈飞%关艳丽
初兆嫻%孟憲誌%桓明輝%陳飛%關豔麗
초조한%맹헌지%환명휘%진비%관염려
不吸水链霉菌梧州新亚种%基因文库%pUC18质粒载体
不吸水鏈黴菌梧州新亞種%基因文庫%pUC18質粒載體
불흡수련매균오주신아충%기인문고%pUC18질립재체
以不吸水链霉菌梧州新亚种为材料,提取的总基因组经Sau3AI不完全酶切,回收 3～9 kb DNA酶切片段,用T4连接酶将回收片段按一定比例与经BamHI酶切、南极热敏磷酸酶去磷酸化处理后的pUC18质粒载体连接,热激法转化受体菌E.coli DH5α,在含有IPTG/X-gal和Amp+的LB平板上筛选重组子,所得克隆数为9×103个,以不吸水链霉菌染色体基因组大小为7 Mb计算,概括了不吸水链霉菌梧州新亚种约99%的基因组,达到了建库要求的理论值.随机挑取白色菌落,提取重组质粒进行酶切电泳分析,均有外源片段插入.基因文库的构建,为进一步深入研究梧宁霉素生物合成基因结构及功能奠定基础.
以不吸水鏈黴菌梧州新亞種為材料,提取的總基因組經Sau3AI不完全酶切,迴收 3～9 kb DNA酶切片段,用T4連接酶將迴收片段按一定比例與經BamHI酶切、南極熱敏燐痠酶去燐痠化處理後的pUC18質粒載體連接,熱激法轉化受體菌E.coli DH5α,在含有IPTG/X-gal和Amp+的LB平闆上篩選重組子,所得剋隆數為9×103箇,以不吸水鏈黴菌染色體基因組大小為7 Mb計算,概括瞭不吸水鏈黴菌梧州新亞種約99%的基因組,達到瞭建庫要求的理論值.隨機挑取白色菌落,提取重組質粒進行酶切電泳分析,均有外源片段插入.基因文庫的構建,為進一步深入研究梧寧黴素生物閤成基因結構及功能奠定基礎.
이불흡수련매균오주신아충위재료,제취적총기인조경Sau3AI불완전매절,회수 3～9 kb DNA매절편단,용T4련접매장회수편단안일정비례여경BamHI매절、남겁열민린산매거린산화처리후적pUC18질립재체련접,열격법전화수체균E.coli DH5α,재함유IPTG/X-gal화Amp+적LB평판상사선중조자,소득극륭수위9×103개,이불흡수련매균염색체기인조대소위7 Mb계산,개괄료불흡수련매균오주신아충약99%적기인조,체도료건고요구적이론치.수궤도취백색균락,제취중조질립진행매절전영분석,균유외원편단삽입.기인문고적구건,위진일보심입연구오저매소생물합성기인결구급공능전정기출.
