第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2007年
16期
1497-1500
,共4页
唐昊喆%王勤涛%董广英%马志伟%丁敖%李长春%孙迎春%王莉
唐昊喆%王勤濤%董廣英%馬誌偉%丁敖%李長春%孫迎春%王莉
당호철%왕근도%동엄영%마지위%정오%리장춘%손영춘%왕리
牙龈%成纤维细胞%骨形态发生蛋白质2%转染%成骨细胞
牙齦%成纖維細胞%骨形態髮生蛋白質2%轉染%成骨細胞
아간%성섬유세포%골형태발생단백질2%전염%성골세포
目的:构建hBMP2基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2并观察其对人牙龈成纤维细胞表型的影响. 方法:采用RT-PCR方法从人成骨肉瘤细胞中克隆hBMP2基因,连接T 载体并测序正确后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接,酶切鉴定后转染入HEK293细胞中,利用荧光显微镜和Western Blot进行表达鉴定,最后转染人牙龈成纤维细胞,通过MTT实验观察转染hBMP2后对人牙龈成纤维细胞增殖特性、ALP活性、OC含量、体外矿化能力的影响. 结果:成功克隆了人BMP2基因,酶切鉴定及测序均正确,真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2能正确表达hBMP2蛋白,hBMP2对人牙龈成纤维细胞增殖特性无影响,但可增强其ALP活性、OC含量及体外矿化能力. 结论:构建了hBMP2基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2,该基因可促进人牙龈成纤维细胞向成骨细胞方向分化.
目的:構建hBMP2基因的真覈錶達載體pIRES2-EGFP-hBMP2併觀察其對人牙齦成纖維細胞錶型的影響. 方法:採用RT-PCR方法從人成骨肉瘤細胞中剋隆hBMP2基因,連接T 載體併測序正確後與真覈錶達載體pIRES2-EGFP連接,酶切鑒定後轉染入HEK293細胞中,利用熒光顯微鏡和Western Blot進行錶達鑒定,最後轉染人牙齦成纖維細胞,通過MTT實驗觀察轉染hBMP2後對人牙齦成纖維細胞增殖特性、ALP活性、OC含量、體外礦化能力的影響. 結果:成功剋隆瞭人BMP2基因,酶切鑒定及測序均正確,真覈錶達載體pIRES2-EGFP-hBMP2能正確錶達hBMP2蛋白,hBMP2對人牙齦成纖維細胞增殖特性無影響,但可增彊其ALP活性、OC含量及體外礦化能力. 結論:構建瞭hBMP2基因的真覈錶達載體pIRES2-EGFP-hBMP2,該基因可促進人牙齦成纖維細胞嚮成骨細胞方嚮分化.
목적:구건hBMP2기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP-hBMP2병관찰기대인아간성섬유세포표형적영향. 방법:채용RT-PCR방법종인성골육류세포중극륭hBMP2기인,련접T 재체병측서정학후여진핵표체재체pIRES2-EGFP련접,매절감정후전염입HEK293세포중,이용형광현미경화Western Blot진행표체감정,최후전염인아간성섬유세포,통과MTT실험관찰전염hBMP2후대인아간성섬유세포증식특성、ALP활성、OC함량、체외광화능력적영향. 결과:성공극륭료인BMP2기인,매절감정급측서균정학,진핵표체재체pIRES2-EGFP-hBMP2능정학표체hBMP2단백,hBMP2대인아간성섬유세포증식특성무영향,단가증강기ALP활성、OC함량급체외광화능력. 결론:구건료hBMP2기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP-hBMP2,해기인가촉진인아간성섬유세포향성골세포방향분화.
