第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2007年
15期
1465-1468
,共4页
常静%雷寒%陈建斌%贾锋鹏
常靜%雷寒%陳建斌%賈鋒鵬
상정%뢰한%진건빈%가봉붕
胎儿心肌细胞%人胚胎干细胞%共同培养%心肌样分化
胎兒心肌細胞%人胚胎榦細胞%共同培養%心肌樣分化
태인심기세포%인배태간세포%공동배양%심기양분화
目的 了解与胎儿心肌细胞共同培养对人胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向心肌方向分化的影响.方法 通过酶消化法从流产胎儿中分离培养出胎儿心肌细胞及成纤维细胞,将后者用丝裂霉素处理后制备成滋养层;收集辅助生育中心施行试管婴儿后所剩余的健康胚胎,取内细胞团接种在滋养层上分离培养出人ESCs.用荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridzation,FISH)方法来检测上述两种细胞的XY染色体,选用不同性别的胎儿心肌细胞与2～5代人ESCs以1∶2的比例混合,然后以5×104/cm2的密度接种于培养皿中进行共同培养,诱导其向心肌方向的分化.将未与胎儿心肌细胞混合的人ESCs以相同密度接种于培养皿中作为阴性对照.至第5天收集共同培养的细胞,进行双重染色,即 FISH染色及心肌特异性蛋白Desmin或cTnI免疫组化染色.结果 在与胎儿心肌细胞共同培养5 d后,40%～50%的人ESCs在心肌细胞的诱导下表达心肌特异性蛋白Desmin或cTnI,而没有进行共同培养的人ESCs不表达上述蛋白.结论 与胎儿心肌细胞的共同培养能诱导人ESCs发生向心肌方向的分化,人ESCs有望成为心肌干细胞移植的细胞材料.
目的 瞭解與胎兒心肌細胞共同培養對人胚胎榦細胞(embryonic stem cells,ESCs)嚮心肌方嚮分化的影響.方法 通過酶消化法從流產胎兒中分離培養齣胎兒心肌細胞及成纖維細胞,將後者用絲裂黴素處理後製備成滋養層;收集輔助生育中心施行試管嬰兒後所剩餘的健康胚胎,取內細胞糰接種在滋養層上分離培養齣人ESCs.用熒光原位雜交(fluorescent in situ hybridzation,FISH)方法來檢測上述兩種細胞的XY染色體,選用不同性彆的胎兒心肌細胞與2～5代人ESCs以1∶2的比例混閤,然後以5×104/cm2的密度接種于培養皿中進行共同培養,誘導其嚮心肌方嚮的分化.將未與胎兒心肌細胞混閤的人ESCs以相同密度接種于培養皿中作為陰性對照.至第5天收集共同培養的細胞,進行雙重染色,即 FISH染色及心肌特異性蛋白Desmin或cTnI免疫組化染色.結果 在與胎兒心肌細胞共同培養5 d後,40%～50%的人ESCs在心肌細胞的誘導下錶達心肌特異性蛋白Desmin或cTnI,而沒有進行共同培養的人ESCs不錶達上述蛋白.結論 與胎兒心肌細胞的共同培養能誘導人ESCs髮生嚮心肌方嚮的分化,人ESCs有望成為心肌榦細胞移植的細胞材料.
목적 료해여태인심기세포공동배양대인배태간세포(embryonic stem cells,ESCs)향심기방향분화적영향.방법 통과매소화법종유산태인중분리배양출태인심기세포급성섬유세포,장후자용사렬매소처리후제비성자양층;수집보조생육중심시행시관영인후소잉여적건강배태,취내세포단접충재자양층상분리배양출인ESCs.용형광원위잡교(fluorescent in situ hybridzation,FISH)방법래검측상술량충세포적XY염색체,선용불동성별적태인심기세포여2～5대인ESCs이1∶2적비례혼합,연후이5×104/cm2적밀도접충우배양명중진행공동배양,유도기향심기방향적분화.장미여태인심기세포혼합적인ESCs이상동밀도접충우배양명중작위음성대조.지제5천수집공동배양적세포,진행쌍중염색,즉 FISH염색급심기특이성단백Desmin혹cTnI면역조화염색.결과 재여태인심기세포공동배양5 d후,40%～50%적인ESCs재심기세포적유도하표체심기특이성단백Desmin혹cTnI,이몰유진행공동배양적인ESCs불표체상술단백.결론 여태인심기세포적공동배양능유도인ESCs발생향심기방향적분화,인ESCs유망성위심기간세포이식적세포재료.
