陕西医学杂志
陝西醫學雜誌
협서의학잡지
SHAANXI MEDICAL JOURNAL
2006年
6期
643-645,657
,共4页
乔庆%窦科峰%陈勇%张静%李剑平%毛海泉
喬慶%竇科峰%陳勇%張靜%李劍平%毛海泉
교경%두과봉%진용%장정%리검평%모해천
@补体衰变加速因子%@补体膜辅助调节蛋白%@CD59%基因%真核表达
@補體衰變加速因子%@補體膜輔助調節蛋白%@CD59%基因%真覈錶達
@보체쇠변가속인자%@보체막보조조절단백%@CD59%기인%진핵표체
目的:构建人补体衰变加速因子(Decay accelerating factor,DAF)、补体膜辅助调节蛋白(membrane cofactor protein,MCP)、CD59的真核表达载体pSecTag2/HygroB-DAF、pSecTag2/HygroB-MCP、pSecTag2/HygroB-CD59.方法:应用PCR方法,从DAF-pGEM-TEasy Vector、MCP-pGEM-T Easy Vector和CD59-pGEM-T Easy Vector分别克隆所需的DNA片段,经限制性内切酶BglⅡandXhol Ⅰ消化后,插入到具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,分别构建人DAF、MCP、CD59真核表达质粒,并进行酶切鉴定及DNA序列测定分析.结果:DAF基因大小为1049bp,MCP基因大小为1065bp,CD59基因大小为312bp,与genbank中记载的人DAF、MCP和CD59 cDNA序列结果基本相同.结论:成功构建DAF、MCP和CD59真核表达质粒,为今后进一步探讨及研究转基因肝脏奠定了基础.
目的:構建人補體衰變加速因子(Decay accelerating factor,DAF)、補體膜輔助調節蛋白(membrane cofactor protein,MCP)、CD59的真覈錶達載體pSecTag2/HygroB-DAF、pSecTag2/HygroB-MCP、pSecTag2/HygroB-CD59.方法:應用PCR方法,從DAF-pGEM-TEasy Vector、MCP-pGEM-T Easy Vector和CD59-pGEM-T Easy Vector分彆剋隆所需的DNA片段,經限製性內切酶BglⅡandXhol Ⅰ消化後,插入到具有相應酶切位點的真覈錶達載體pSecTag2/HygroB中,分彆構建人DAF、MCP、CD59真覈錶達質粒,併進行酶切鑒定及DNA序列測定分析.結果:DAF基因大小為1049bp,MCP基因大小為1065bp,CD59基因大小為312bp,與genbank中記載的人DAF、MCP和CD59 cDNA序列結果基本相同.結論:成功構建DAF、MCP和CD59真覈錶達質粒,為今後進一步探討及研究轉基因肝髒奠定瞭基礎.
목적:구건인보체쇠변가속인자(Decay accelerating factor,DAF)、보체막보조조절단백(membrane cofactor protein,MCP)、CD59적진핵표체재체pSecTag2/HygroB-DAF、pSecTag2/HygroB-MCP、pSecTag2/HygroB-CD59.방법:응용PCR방법,종DAF-pGEM-TEasy Vector、MCP-pGEM-T Easy Vector화CD59-pGEM-T Easy Vector분별극륭소수적DNA편단,경한제성내절매BglⅡandXhol Ⅰ소화후,삽입도구유상응매절위점적진핵표체재체pSecTag2/HygroB중,분별구건인DAF、MCP、CD59진핵표체질립,병진행매절감정급DNA서렬측정분석.결과:DAF기인대소위1049bp,MCP기인대소위1065bp,CD59기인대소위312bp,여genbank중기재적인DAF、MCP화CD59 cDNA서렬결과기본상동.결론:성공구건DAF、MCP화CD59진핵표체질립,위금후진일보탐토급연구전기인간장전정료기출.
