CAJ | 학술논문

将对数期的钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)(原名钝顶螺旋藻,Spirulina platensis)A9菌株用超声波40 s预处理破碎成2个～4个细胞大小的片断,分别用不同剂量的紫外线(UV)和60Coγ射线处理,诱变后经3小时避光预培养分别接种于液体和固体培养基进行培养.固体培养时UV照射70 s和60Coγ照射3 500 Gy后无菌体存活,而在液体培养中高剂量处理的样品可以部分恢复生长.将诱变后的菌液分别加入20μg·mL-1的ρ-氟苯丙氨酸(ρ-fluorophenylalanine,FPA)和20μg·mL-1的刀豆氨酸(L-canavanine sulphate,CS),放入光照培养箱中预培养3 d～4 d后涂于含相同浓度的氨基酸类似物FPA和CS平板,培养30 d后计算抗氨基酸类似物突变株的突变率.UV对A9菌株的完全致死剂量LD和存活率37%时的剂量D37值分别为70 s和22 s,LD/D37=3.18.A9菌株经UV诱变25 s时存活率为28.7%,抗FPA和抗CS突变率分别为2.31×10-3和1.50×10-3,最大诱变效应比(MME)分别为48.53和52.63.60Coγ射线对A9菌株的LD和D37值分别为3 500 Gy、1 250 Gy,LD/D37=2.8.60Coγ射线显著提高A9菌株的突变率,当诱变剂量为2 000Gy、存活率为10.49%时A9菌株突变率最高,抗FPA和抗CS突变率分别为5.07×10-3和0.964×10-3,最大诱变效应比(MME)分别为241.43和74.15.60Coγ射线对钝顶节旋藻A9菌株的损伤比UV造成的损伤强烈(低的LD/D37值),比UV具有较大的诱变效应(高MME值).采用两种诱变剂获得的抗FPA突变率都要高于抗CS突变率.通过诱变获得了大量的抗氨基酸类似物突变株,为遗传重组研究提供携带重要遗传标记的材料.
장대수기적둔정절선조(Arthrospira platensis)(원명둔정라선조,Spirulina platensis)A9균주용초성파40 s예처리파쇄성2개～4개세포대소적편단,분별용불동제량적자외선(UV)화60Coγ사선처리,유변후경3소시피광예배양분별접충우액체화고체배양기진행배양.고체배양시UV조사70 s화60Coγ조사3 500 Gy후무균체존활,이재액체배양중고제량처리적양품가이부분회복생장.장유변후적균액분별가입20μg·mL-1적ρ-불분병안산(ρ-fluorophenylalanine,FPA)화20μg·mL-1적도두안산(L-canavanine sulphate,CS),방입광조배양상중예배양3 d～4 d후도우함상동농도적안기산유사물FPA화CS평판,배양30 d후계산항안기산유사물돌변주적돌변솔.UV대A9균주적완전치사제량LD화존활솔37%시적제량D37치분별위70 s화22 s,LD/D37=3.18.A9균주경UV유변25 s시존활솔위28.7%,항FPA화항CS돌변솔분별위2.31×10-3화1.50×10-3,최대유변효응비(MME)분별위48.53화52.63.60Coγ사선대A9균주적LD화D37치분별위3 500 Gy、1 250 Gy,LD/D37=2.8.60Coγ사선현저제고A9균주적돌변솔,당유변제량위2 000Gy、존활솔위10.49%시A9균주돌변솔최고,항FPA화항CS돌변솔분별위5.07×10-3화0.964×10-3,최대유변효응비(MME)분별위241.43화74.15.60Coγ사선대둔정절선조A9균주적손상비UV조성적손상강렬(저적LD/D37치),비UV구유교대적유변효응(고MME치).채용량충유변제획득적항FPA돌변솔도요고우항CS돌변솔.통과유변획득료대량적항안기산유사물돌변주,위유전중조연구제공휴대중요유전표기적재료.