CAJ | 학술논문

目的:探讨小鼠胚胎干细胞在体外分化心肌样细胞过程中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况以及分化的心肌样细胞的电生理特点.方法:将转染PαMHC-EGFP小鼠D3胚胎干细胞系,体外诱导分化心肌样细胞,应用RT-PCR检测0 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d拟胚体(EB)细胞中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况,同时应用膜片钳技术,观察心肌样细胞的电生理特性.结果:在EB形成的7d和8d可见EB内出现有绿色荧光蛋白表达的心肌样细胞群;RT-PCR结果显示αMHC基因表达在EB体形成第7 d,而在10 d、14 d跳动的心肌样细胞中该基因表达增强(P＜0.05),而Anf、MLC2v基因的表达仅出现在心肌样细胞;膜片钳记录的心肌样细胞动作电位显示,73.5%(n=34)的细胞记录到典型心房肌细胞动作电位[APD90=(78.4±3.1)ms];20.5%细胞表现为起搏细胞动作电位[APD90=(112.6±5.5)ms];1个细胞显示了典型的心室肌细胞动作电位的特征(APD90=200 ms).结论:在心肌样细胞分化的早期可见αMHC、Anf、MLC2v基因的表达,这3种基因可为心肌发育过程中的特征性基因并对心肌发育起调节作用.而此干细胞系分化的心肌样细胞主要为心房肌细胞和起搏细胞.
목적:탐토소서배태간세포재체외분화심기양세포과정중αMHC、Anf、MLC2v기인적표체정황이급분화적심기양세포적전생리특점.방법:장전염PαMHC-EGFP소서D3배태간세포계,체외유도분화심기양세포,응용RT-PCR검측0 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d의배체(EB)세포중αMHC、Anf、MLC2v기인적표체정황,동시응용막편겸기술,관찰심기양세포적전생리특성.결과:재EB형성적7d화8d가견EB내출현유록색형광단백표체적심기양세포군;RT-PCR결과현시αMHC기인표체재EB체형성제7 d,이재10 d、14 d도동적심기양세포중해기인표체증강(P＜0.05),이Anf、MLC2v기인적표체부출현재심기양세포;막편겸기록적심기양세포동작전위현시,73.5%(n=34)적세포기록도전형심방기세포동작전위[APD90=(78.4±3.1)ms];20.5%세포표현위기박세포동작전위[APD90=(112.6±5.5)ms];1개세포현시료전형적심실기세포동작전위적특정(APD90=200 ms).결론:재심기양세포분화적조기가견αMHC、Anf、MLC2v기인적표체,저3충기인가위심기발육과정중적특정성기인병대심기발육기조절작용.이차간세포계분화적심기양세포주요위심방기세포화기박세포.