中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2006年
2期
379-383
,共5页
原野%张云生%李秀森%郭子宽%刘晓丹%侯春梅%唐佩弦%毛宁
原野%張雲生%李秀森%郭子寬%劉曉丹%侯春梅%唐珮絃%毛寧
원야%장운생%리수삼%곽자관%류효단%후춘매%당패현%모저
人干细胞生长因子%CRD区%cDNA克隆%融合表达%造血种属特异性
人榦細胞生長因子%CRD區%cDNA剋隆%融閤錶達%造血種屬特異性
인간세포생장인자%CRD구%cDNA극륭%융합표체%조혈충속특이성
人干细胞生长因子(human stem ceil growthfactor,hSCGF)是一种早期造血调控因子.已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(caldum-dependent carbohydraterecognition domain,CRD)内缺失78氨基酸的截短型分子hSCGFβ.hSCGFβ的造血刺激活性具有严格的种属特异性.本研究目的在于探讨hSCGF能否协同刺激小鼠粒/单系祖细胞增殖.为克服hSCGF的cDNA GC含量较高的困难,本研究以两步PCR的方法从人胎肝cDNA文库(Clontech)中成功克隆hSCGF cDNA,进而将hSCGF成熟肽编码序列亚克隆于原核表达载体pGEX4T-2中,融合表达.研究结果表明,通过低温诱导(28℃),重组表达产物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中,利用亲和层析纯化融合表达蛋白.对重组蛋白的造血刺激活性分析表明,不同于截短型分子hSCGFβ,全长分子hSCGF能够刺激小鼠骨髓粒/单系造血祖细胞增殖.结论:hSCGFCRD不直接结合受体,可能具有其他生物学功能.
人榦細胞生長因子(human stem ceil growthfactor,hSCGF)是一種早期造血調控因子.已知人榦細胞生長因子具有兩種形式,包括全長分子hSCGF以及在Ca2+依賴糖識彆結構域(caldum-dependent carbohydraterecognition domain,CRD)內缺失78氨基痠的截短型分子hSCGFβ.hSCGFβ的造血刺激活性具有嚴格的種屬特異性.本研究目的在于探討hSCGF能否協同刺激小鼠粒/單繫祖細胞增殖.為剋服hSCGF的cDNA GC含量較高的睏難,本研究以兩步PCR的方法從人胎肝cDNA文庫(Clontech)中成功剋隆hSCGF cDNA,進而將hSCGF成熟肽編碼序列亞剋隆于原覈錶達載體pGEX4T-2中,融閤錶達.研究結果錶明,通過低溫誘導(28℃),重組錶達產物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中,利用親和層析純化融閤錶達蛋白.對重組蛋白的造血刺激活性分析錶明,不同于截短型分子hSCGFβ,全長分子hSCGF能夠刺激小鼠骨髓粒/單繫造血祖細胞增殖.結論:hSCGFCRD不直接結閤受體,可能具有其他生物學功能.
인간세포생장인자(human stem ceil growthfactor,hSCGF)시일충조기조혈조공인자.이지인간세포생장인자구유량충형식,포괄전장분자hSCGF이급재Ca2+의뢰당식별결구역(caldum-dependent carbohydraterecognition domain,CRD)내결실78안기산적절단형분자hSCGFβ.hSCGFβ적조혈자격활성구유엄격적충속특이성.본연구목적재우탐토hSCGF능부협동자격소서립/단계조세포증식.위극복hSCGF적cDNA GC함량교고적곤난,본연구이량보PCR적방법종인태간cDNA문고(Clontech)중성공극륭hSCGF cDNA,진이장hSCGF성숙태편마서렬아극륭우원핵표체재체pGEX4T-2중,융합표체.연구결과표명,통과저온유도(28℃),중조표체산물주요이가용단백적형식존재우렬해상청중,이용친화층석순화융합표체단백.대중조단백적조혈자격활성분석표명,불동우절단형분자hSCGFβ,전장분자hSCGF능구자격소서골수립/단계조혈조세포증식.결론:hSCGFCRD불직접결합수체,가능구유기타생물학공능.
