微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2006年
1期
1-5
,共5页
刘毅%韩金祥%邵金辉%朱波%朱有名
劉毅%韓金祥%邵金輝%硃波%硃有名
류의%한금상%소금휘%주파%주유명
单纯疱疹病毒2型%包膜糖蛋白D%重组%毕赤酵母
單純皰疹病毒2型%包膜糖蛋白D%重組%畢赤酵母
단순포진병독2형%포막당단백D%중조%필적효모
构建单纯疱疹病毒2型包膜糖蛋白D成熟肽基因毕赤酵母表达载体,并对序列进行分析,为进行高抗原性的真核表达重组gD蛋白奠定基础.采用PCR扩增HSV2-gD成熟肽基因,将该段基因克隆于pGEM-T克隆载体,转化鉴定后,与巴斯德毕赤酵母表达载体(pPIC9K)酶切连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选测序确定构建了pPIC9K-gD的真核表达载体,对克隆的序列进行分析,预测表达产物的理化特性及抗原性.结果显示,获得的重组的酵母表达载体pPIC9K-gD,测序结果证实为HSV2-gD成熟肽基因,序列分析其高度保守,预测蛋白分子量40.63kD,等电点pI为7.15,包含完整成熟肽分值达1.7的多个抗原决定簇.成功构建了HSV2-gD成熟肽基因的毕赤酵母表达载体.
構建單純皰疹病毒2型包膜糖蛋白D成熟肽基因畢赤酵母錶達載體,併對序列進行分析,為進行高抗原性的真覈錶達重組gD蛋白奠定基礎.採用PCR擴增HSV2-gD成熟肽基因,將該段基因剋隆于pGEM-T剋隆載體,轉化鑒定後,與巴斯德畢赤酵母錶達載體(pPIC9K)酶切連接,轉化大腸桿菌DH5α,篩選測序確定構建瞭pPIC9K-gD的真覈錶達載體,對剋隆的序列進行分析,預測錶達產物的理化特性及抗原性.結果顯示,穫得的重組的酵母錶達載體pPIC9K-gD,測序結果證實為HSV2-gD成熟肽基因,序列分析其高度保守,預測蛋白分子量40.63kD,等電點pI為7.15,包含完整成熟肽分值達1.7的多箇抗原決定簇.成功構建瞭HSV2-gD成熟肽基因的畢赤酵母錶達載體.
구건단순포진병독2형포막당단백D성숙태기인필적효모표체재체,병대서렬진행분석,위진행고항원성적진핵표체중조gD단백전정기출.채용PCR확증HSV2-gD성숙태기인,장해단기인극륭우pGEM-T극륭재체,전화감정후,여파사덕필적효모표체재체(pPIC9K)매절련접,전화대장간균DH5α,사선측서학정구건료pPIC9K-gD적진핵표체재체,대극륭적서렬진행분석,예측표체산물적이화특성급항원성.결과현시,획득적중조적효모표체재체pPIC9K-gD,측서결과증실위HSV2-gD성숙태기인,서렬분석기고도보수,예측단백분자량40.63kD,등전점pI위7.15,포함완정성숙태분치체1.7적다개항원결정족.성공구건료HSV2-gD성숙태기인적필적효모표체재체.
