中国计划免疫
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CHINESE JOURNAL OF VACCINES AND IMMUNIZATION
2005年
3期
175-180
,共6页
马雷钧%徐闻青%徐帆洪%王兵%陈志慧
馬雷鈞%徐聞青%徐帆洪%王兵%陳誌慧
마뢰균%서문청%서범홍%왕병%진지혜
麻疹病毒疫苗株%核蛋白基因%核苷酸序列
痳疹病毒疫苗株%覈蛋白基因%覈苷痠序列
마진병독역묘주%핵단백기인%핵감산서렬
目的研究沪191(S191)麻疹病毒疫苗株的核蛋白(N)基因.方法将S191株主代病毒(HK33HAM39CEC20)在实验室连续传递11代,从原代鸡胚细胞(CEC)20代连续传至CEC31代.除观察每代病毒培养特性外,还选其中的21、22、25、26、29、30、31代病毒及S191强毒株(HK33HAM45)、Edmonston(Ed)强毒株(HK28HAM40MRC-55),以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对这些病毒标本的N基因编码区的全长以及羧基末端的450个核苷酸区域进行片段扩增.结果通过N基因的序列分析发现,S191疫苗株与强毒株在N基因上有10~13个核苷酸差异,差异率为0.63%~0.82%.S191株主代病毒在CEC上连续传递11代的过程中,有2个代次病毒的个别核苷酸出现有义突变,分别导致第22代病毒的278位氨基酸Glu→Lys,第26代病毒的341位氨基酸Val→Lys,但这一变化不存在重复性,随着继续传代又恢复到21代的序列水平.结论S191麻疹病毒疫苗株在CEC长期传代过程中,各代次之间的N基因高变区序列一致,包括N基因中与免疫功能有关的3个B细胞表位区域的序列在传代中也无改变,故不可能影响到疫苗的免疫效果.
目的研究滬191(S191)痳疹病毒疫苗株的覈蛋白(N)基因.方法將S191株主代病毒(HK33HAM39CEC20)在實驗室連續傳遞11代,從原代鷄胚細胞(CEC)20代連續傳至CEC31代.除觀察每代病毒培養特性外,還選其中的21、22、25、26、29、30、31代病毒及S191彊毒株(HK33HAM45)、Edmonston(Ed)彊毒株(HK28HAM40MRC-55),以逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)技術對這些病毒標本的N基因編碼區的全長以及羧基末耑的450箇覈苷痠區域進行片段擴增.結果通過N基因的序列分析髮現,S191疫苗株與彊毒株在N基因上有10~13箇覈苷痠差異,差異率為0.63%~0.82%.S191株主代病毒在CEC上連續傳遞11代的過程中,有2箇代次病毒的箇彆覈苷痠齣現有義突變,分彆導緻第22代病毒的278位氨基痠Glu→Lys,第26代病毒的341位氨基痠Val→Lys,但這一變化不存在重複性,隨著繼續傳代又恢複到21代的序列水平.結論S191痳疹病毒疫苗株在CEC長期傳代過程中,各代次之間的N基因高變區序列一緻,包括N基因中與免疫功能有關的3箇B細胞錶位區域的序列在傳代中也無改變,故不可能影響到疫苗的免疫效果.
목적연구호191(S191)마진병독역묘주적핵단백(N)기인.방법장S191주주대병독(HK33HAM39CEC20)재실험실련속전체11대,종원대계배세포(CEC)20대련속전지CEC31대.제관찰매대병독배양특성외,환선기중적21、22、25、26、29、30、31대병독급S191강독주(HK33HAM45)、Edmonston(Ed)강독주(HK28HAM40MRC-55),이역전록-취합매련반응(RT-PCR)기술대저사병독표본적N기인편마구적전장이급최기말단적450개핵감산구역진행편단확증.결과통과N기인적서렬분석발현,S191역묘주여강독주재N기인상유10~13개핵감산차이,차이솔위0.63%~0.82%.S191주주대병독재CEC상련속전체11대적과정중,유2개대차병독적개별핵감산출현유의돌변,분별도치제22대병독적278위안기산Glu→Lys,제26대병독적341위안기산Val→Lys,단저일변화불존재중복성,수착계속전대우회복도21대적서렬수평.결론S191마진병독역묘주재CEC장기전대과정중,각대차지간적N기인고변구서렬일치,포괄N기인중여면역공능유관적3개B세포표위구역적서렬재전대중야무개변,고불가능영향도역묘적면역효과.