山东大学学报(理学版)
山東大學學報(理學版)
산동대학학보(이학판)
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY
2004年
2期
120-124
,共5页
周凯松%薛久刚%黄芳%张晗星%张长铠
週凱鬆%薛久剛%黃芳%張晗星%張長鎧
주개송%설구강%황방%장함성%장장개
火菇素%金针菇%cDNA%表达文库%免疫筛选
火菇素%金針菇%cDNA%錶達文庫%免疫篩選
화고소%금침고%cDNA%표체문고%면역사선
火菇素是一种具有抗癌活性的简单蛋白,从金针菇中分离纯化火菇素的方法如下:金针菇子实体经乙酸液浸提、硫酸铵和乙醇分级沉淀后,通过DEAE-Sephadex A-50除去色素和部分杂蛋白,最后经CM-Sephadex C-50离子交换柱层析分离,得到了电泳均一的纯化蛋白.以火菇素为抗原制备的抗血清为探针对构建的金针菇cDNA表达文库进行免疫印记筛选,对获得的阳性克隆进行PCR、酶切以及在大肠杆菌中诱导表达等初步鉴定,为进一步确证、克隆火菇素基因打下了基础.
火菇素是一種具有抗癌活性的簡單蛋白,從金針菇中分離純化火菇素的方法如下:金針菇子實體經乙痠液浸提、硫痠銨和乙醇分級沉澱後,通過DEAE-Sephadex A-50除去色素和部分雜蛋白,最後經CM-Sephadex C-50離子交換柱層析分離,得到瞭電泳均一的純化蛋白.以火菇素為抗原製備的抗血清為探針對構建的金針菇cDNA錶達文庫進行免疫印記篩選,對穫得的暘性剋隆進行PCR、酶切以及在大腸桿菌中誘導錶達等初步鑒定,為進一步確證、剋隆火菇素基因打下瞭基礎.
화고소시일충구유항암활성적간단단백,종금침고중분리순화화고소적방법여하:금침고자실체경을산액침제、류산안화을순분급침정후,통과DEAE-Sephadex A-50제거색소화부분잡단백,최후경CM-Sephadex C-50리자교환주층석분리,득도료전영균일적순화단백.이화고소위항원제비적항혈청위탐침대구건적금침고cDNA표체문고진행면역인기사선,대획득적양성극륭진행PCR、매절이급재대장간균중유도표체등초보감정,위진일보학증、극륭화고소기인타하료기출.
