化学研究与应用
化學研究與應用
화학연구여응용
CHEMICAL RESEARCH AND APPLICATION
2003年
3期
348-350
,共3页
莫宏春%刘克武%孟延发%江琰%秦岭%宋贤丽
莫宏春%劉剋武%孟延髮%江琰%秦嶺%宋賢麗
막굉춘%류극무%맹연발%강염%진령%송현려
枯草芽孢杆菌%6-磷酸葡萄糖脱氢酶%纯化%荧光光谱
枯草芽孢桿菌%6-燐痠葡萄糖脫氫酶%純化%熒光光譜
고초아포간균%6-린산포도당탈경매%순화%형광광보
枯草芽孢杆菌通过超声破壁,(NH4)2SO4分段盐析,DEAE-Sepharose FF离子交换层析,Blue-Sepharose CL-6B亲和层析,Sephadex G-200凝胶过滤等纯化步骤,分离出6-磷酸葡萄糖脱氢酶.经PAGE和SDS-PAGE检测为单一蛋白区带,比活1.7375IU/mg,纯化倍数72.7,收率13.6%.凝胶过滤法测定表观分子量220KD,SDS-PAGE测定亚基分子量50.5KD,可见该酶是由四个相同亚基构成的四聚体.测定最适pH、温度分别为8.5,37℃,底物G6P的Km值0.177mmol*L-1.考察了部分金属离子及EDPA对该酶活性、紫外、荧光光谱的影响.
枯草芽孢桿菌通過超聲破壁,(NH4)2SO4分段鹽析,DEAE-Sepharose FF離子交換層析,Blue-Sepharose CL-6B親和層析,Sephadex G-200凝膠過濾等純化步驟,分離齣6-燐痠葡萄糖脫氫酶.經PAGE和SDS-PAGE檢測為單一蛋白區帶,比活1.7375IU/mg,純化倍數72.7,收率13.6%.凝膠過濾法測定錶觀分子量220KD,SDS-PAGE測定亞基分子量50.5KD,可見該酶是由四箇相同亞基構成的四聚體.測定最適pH、溫度分彆為8.5,37℃,底物G6P的Km值0.177mmol*L-1.攷察瞭部分金屬離子及EDPA對該酶活性、紫外、熒光光譜的影響.
고초아포간균통과초성파벽,(NH4)2SO4분단염석,DEAE-Sepharose FF리자교환층석,Blue-Sepharose CL-6B친화층석,Sephadex G-200응효과려등순화보취,분리출6-린산포도당탈경매.경PAGE화SDS-PAGE검측위단일단백구대,비활1.7375IU/mg,순화배수72.7,수솔13.6%.응효과려법측정표관분자량220KD,SDS-PAGE측정아기분자량50.5KD,가견해매시유사개상동아기구성적사취체.측정최괄pH、온도분별위8.5,37℃,저물G6P적Km치0.177mmol*L-1.고찰료부분금속리자급EDPA대해매활성、자외、형광광보적영향.
