高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2003年
1期
32-36
,共5页
赵莉霞%钮利喜%范俊虎%袁静明
趙莉霞%鈕利喜%範俊虎%袁靜明
조리하%뉴리희%범준호%원정명
N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶%菌株No.2262%PCR扩增%DNA序列%表达
N-氨甲酰基-D-氨基痠酰胺水解酶%菌株No.2262%PCR擴增%DNA序列%錶達
N-안갑선기-D-안기산선알수해매%균주No.2262%PCR확증%DNA서렬%표체
按本室纯化的N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶(DCase)的N-末端氨基酸序列设计了正向引物,并在已报道的不同来源菌株DCase的氨基酸序列同源性分析的基础上,设计了反向引物.用菌株No.2262总DNA为模板,经PCR扩增获得长度为约0.9kpb的片段,DNA序列分析表明基因全长为912bp.将该片段插入pET-3a,构建成重组子pET-DCase,并在E.coli DH5α中获得表达,经SDS-PAGE检测,表达产物分子量与天然纯DCase相同,约为35kD.
按本室純化的N-氨甲酰基-D-氨基痠酰胺水解酶(DCase)的N-末耑氨基痠序列設計瞭正嚮引物,併在已報道的不同來源菌株DCase的氨基痠序列同源性分析的基礎上,設計瞭反嚮引物.用菌株No.2262總DNA為模闆,經PCR擴增穫得長度為約0.9kpb的片段,DNA序列分析錶明基因全長為912bp.將該片段插入pET-3a,構建成重組子pET-DCase,併在E.coli DH5α中穫得錶達,經SDS-PAGE檢測,錶達產物分子量與天然純DCase相同,約為35kD.
안본실순화적N-안갑선기-D-안기산선알수해매(DCase)적N-말단안기산서렬설계료정향인물,병재이보도적불동래원균주DCase적안기산서렬동원성분석적기출상,설계료반향인물.용균주No.2262총DNA위모판,경PCR확증획득장도위약0.9kpb적편단,DNA서렬분석표명기인전장위912bp.장해편단삽입pET-3a,구건성중조자pET-DCase,병재E.coli DH5α중획득표체,경SDS-PAGE검측,표체산물분자량여천연순DCase상동,약위35kD.