浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2003年
1期
4-8
,共5页
陈喆%严杰%毛亚飞%钊守凤
陳喆%嚴傑%毛亞飛%釗守鳳
진철%엄걸%모아비%쇠수봉
幽门,螺杆菌%ureB基因%碱基序列%克隆,分子%UreB融合蛋白/免疫性
幽門,螺桿菌%ureB基因%堿基序列%剋隆,分子%UreB融閤蛋白/免疫性
유문,라간균%ureB기인%감기서렬%극륭,분자%UreB융합단백/면역성
目的:克隆幽门螺杆菌(Hp)ureB基因并构建其原核表达系统.方法:采用高保真PCR从幽门螺杆菌临床分离菌株Y06中扩增ureB基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a的ureB表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达,采用Hp全菌抗体的Western blot和兔抗融合蛋白血清的免疫扩散试验鉴定其免疫性.结果:所克隆的ureB基因与报道的相应核苷酸序列同源性为96.88%～97.82%,氨基酸序列同源性高达99.65%～99.82%.pET32a-ureB-BL21DE3系统的UreB融合蛋白表达量高达细菌总蛋白的40%左右.UreB融合蛋白能与Hp全菌抗体发生结合反应,免疫家兔能获得高效价抗体.结论:本研究成功地构建了Hp ureB高效表达系统,所表达的UreB融合蛋白有良好的免疫原性和免疫反应性,可作为Hp疫苗的抗原.
目的:剋隆幽門螺桿菌(Hp)ureB基因併構建其原覈錶達繫統.方法:採用高保真PCR從幽門螺桿菌臨床分離菌株Y06中擴增ureB基因,T-A剋隆後測定覈苷痠序列,構建pET32a的ureB錶達載體,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同濃度的IPTG誘導錶達,採用Hp全菌抗體的Western blot和兔抗融閤蛋白血清的免疫擴散試驗鑒定其免疫性.結果:所剋隆的ureB基因與報道的相應覈苷痠序列同源性為96.88%～97.82%,氨基痠序列同源性高達99.65%～99.82%.pET32a-ureB-BL21DE3繫統的UreB融閤蛋白錶達量高達細菌總蛋白的40%左右.UreB融閤蛋白能與Hp全菌抗體髮生結閤反應,免疫傢兔能穫得高效價抗體.結論:本研究成功地構建瞭Hp ureB高效錶達繫統,所錶達的UreB融閤蛋白有良好的免疫原性和免疫反應性,可作為Hp疫苗的抗原.
목적:극륭유문라간균(Hp)ureB기인병구건기원핵표체계통.방법:채용고보진PCR종유문라간균림상분리균주Y06중확증ureB기인,T-A극륭후측정핵감산서렬,구건pET32a적ureB표체재체,재E.coli BL21DE3숙주균중용불동농도적IPTG유도표체,채용Hp전균항체적Western blot화토항융합단백혈청적면역확산시험감정기면역성.결과:소극륭적ureB기인여보도적상응핵감산서렬동원성위96.88%～97.82%,안기산서렬동원성고체99.65%～99.82%.pET32a-ureB-BL21DE3계통적UreB융합단백표체량고체세균총단백적40%좌우.UreB융합단백능여Hp전균항체발생결합반응,면역가토능획득고효개항체.결론:본연구성공지구건료Hp ureB고효표체계통,소표체적UreB융합단백유량호적면역원성화면역반응성,가작위Hp역묘적항원.
