中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2003年
1期
56-64
,共9页
陈巨莲%倪汉祥%孙京瑞%G.Weng
陳巨蓮%倪漢祥%孫京瑞%G.Weng
진거련%예한상%손경서%G.Weng
G蛋白Gβ1γ2亚基 表面胞质团共振(SPR) 腺苷酸环化酶(AC) BIAcore技术 信号传导
G蛋白Gβ1γ2亞基 錶麵胞質糰共振(SPR) 腺苷痠環化酶(AC) BIAcore技術 信號傳導
G단백Gβ1γ2아기 표면포질단공진(SPR) 선감산배화매(AC) BIAcore기술 신호전도
对G蛋白Gβ1γ2亚基及偶联组分在信号传导中的作用进行了初步研究. 以离体昆虫细胞Sf9(Spodoptera frugiperda, 秋粘虫卵巢细胞)或H5(Trichoplusia ni, 粉纹夜蛾细胞)为生物反应器, 高效表达了G蛋白Gβ1γ2亚基. 用Ni-NTA亲和层析柱, 经快速蛋白纯化技术(FPLC)获得高纯度的GGβ1γ2. 活性测定表明, 纯化的GGβ1γ2能显著刺激腺苷酸环化酶(AC2)的活力. 应用基于表面胞质团共振现象的BIAcore技术, 采用生物传感芯片NTA(biosensor chip NTA)直接证明腺苷酸环化酶2 (AC2)的胞质末端C2区域为G蛋白Gβ1γ2亚基的结合区, 从而明确了二者互作的活性位点和结合位点同位于该区域.
對G蛋白Gβ1γ2亞基及偶聯組分在信號傳導中的作用進行瞭初步研究. 以離體昆蟲細胞Sf9(Spodoptera frugiperda, 鞦粘蟲卵巢細胞)或H5(Trichoplusia ni, 粉紋夜蛾細胞)為生物反應器, 高效錶達瞭G蛋白Gβ1γ2亞基. 用Ni-NTA親和層析柱, 經快速蛋白純化技術(FPLC)穫得高純度的GGβ1γ2. 活性測定錶明, 純化的GGβ1γ2能顯著刺激腺苷痠環化酶(AC2)的活力. 應用基于錶麵胞質糰共振現象的BIAcore技術, 採用生物傳感芯片NTA(biosensor chip NTA)直接證明腺苷痠環化酶2 (AC2)的胞質末耑C2區域為G蛋白Gβ1γ2亞基的結閤區, 從而明確瞭二者互作的活性位點和結閤位點同位于該區域.
대G단백Gβ1γ2아기급우련조분재신호전도중적작용진행료초보연구. 이리체곤충세포Sf9(Spodoptera frugiperda, 추점충란소세포)혹H5(Trichoplusia ni, 분문야아세포)위생물반응기, 고효표체료G단백Gβ1γ2아기. 용Ni-NTA친화층석주, 경쾌속단백순화기술(FPLC)획득고순도적GGβ1γ2. 활성측정표명, 순화적GGβ1γ2능현저자격선감산배화매(AC2)적활력. 응용기우표면포질단공진현상적BIAcore기술, 채용생물전감심편NTA(biosensor chip NTA)직접증명선감산배화매2 (AC2)적포질말단C2구역위G단백Gβ1γ2아기적결합구, 종이명학료이자호작적활성위점화결합위점동위우해구역.
