中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2003年
1期
7-9
,共3页
杨静%诸欣平%杨雅平%周蕾%Pascal Boireau%詹斌%冯建军%Hotez Peter
楊靜%諸訢平%楊雅平%週蕾%Pascal Boireau%詹斌%馮建軍%Hotez Peter
양정%제흔평%양아평%주뢰%Pascal Boireau%첨빈%풍건군%Hotez Peter
旋毛虫%免疫筛选%cDNA克隆%原核表达
鏇毛蟲%免疫篩選%cDNA剋隆%原覈錶達
선모충%면역사선%cDNA극륭%원핵표체
目的获取旋毛虫抗原的cDNA克隆并进行蛋白的原核表达. 方法应用兔抗旋毛虫成虫可溶性全虫抗原血清对旋毛虫成虫cDNA文库进行筛选,并用兔人工感染旋毛虫血清对强阳性克隆进行再筛选.将编号为Ts87阳性克隆的基因片段亚克隆入PET-28a(+)表达载体,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE电泳分析表达产物. 结果免疫筛选获得阳性克隆Ts87;成功构建重组表达质粒PET-28a(+)/Ts87.诱导表达该融合蛋白,SDS-PAGE电泳表明,其能表达一分子质量约为40 ku的融合蛋白,与预测分子质量相符. 结论筛选到cDNA克隆Ts87,与兔抗旋毛虫成虫可溶性全虫抗原血清和兔人工感染旋毛虫血清均产生特异性免疫反应;PET原核表达系统所获重组蛋白为蛋白功能研究奠定了基础.
目的穫取鏇毛蟲抗原的cDNA剋隆併進行蛋白的原覈錶達. 方法應用兔抗鏇毛蟲成蟲可溶性全蟲抗原血清對鏇毛蟲成蟲cDNA文庫進行篩選,併用兔人工感染鏇毛蟲血清對彊暘性剋隆進行再篩選.將編號為Ts87暘性剋隆的基因片段亞剋隆入PET-28a(+)錶達載體,IPTG誘導錶達後用SDS-PAGE電泳分析錶達產物. 結果免疫篩選穫得暘性剋隆Ts87;成功構建重組錶達質粒PET-28a(+)/Ts87.誘導錶達該融閤蛋白,SDS-PAGE電泳錶明,其能錶達一分子質量約為40 ku的融閤蛋白,與預測分子質量相符. 結論篩選到cDNA剋隆Ts87,與兔抗鏇毛蟲成蟲可溶性全蟲抗原血清和兔人工感染鏇毛蟲血清均產生特異性免疫反應;PET原覈錶達繫統所穫重組蛋白為蛋白功能研究奠定瞭基礎.
목적획취선모충항원적cDNA극륭병진행단백적원핵표체. 방법응용토항선모충성충가용성전충항원혈청대선모충성충cDNA문고진행사선,병용토인공감염선모충혈청대강양성극륭진행재사선.장편호위Ts87양성극륭적기인편단아극륭입PET-28a(+)표체재체,IPTG유도표체후용SDS-PAGE전영분석표체산물. 결과면역사선획득양성극륭Ts87;성공구건중조표체질립PET-28a(+)/Ts87.유도표체해융합단백,SDS-PAGE전영표명,기능표체일분자질량약위40 ku적융합단백,여예측분자질량상부. 결론사선도cDNA극륭Ts87,여토항선모충성충가용성전충항원혈청화토인공감염선모충혈청균산생특이성면역반응;PET원핵표체계통소획중조단백위단백공능연구전정료기출.
