解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2002年
1期
88-92
,共5页
金梅林%丁明孝%云径平%张萍%陈约翰%邱殷庆
金梅林%丁明孝%雲徑平%張萍%陳約翰%邱慇慶
금매림%정명효%운경평%장평%진약한%구은경
细胞凋亡%HL-60细胞%核基质蛋白%细胞总蛋白%热休克 蛋白表达
細胞凋亡%HL-60細胞%覈基質蛋白%細胞總蛋白%熱休剋 蛋白錶達
세포조망%HL-60세포%핵기질단백%세포총단백%열휴극 단백표체
目的研究VP-16诱导HL-60细胞凋亡的变化特点以及凋亡细胞及核基质中热休克蛋白(HSP)表达的变化. 方法琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞基因组DNA断裂;TUNEL法观察凋亡细胞的形态学变化;用免疫印迹方法显示凋亡细胞核基质蛋白、细胞总蛋白中HSP表达的差异. 结果 VP-16作用HL-60细胞0.5?h出现早期凋亡特征.作用4?h可见明显的DNA梯状条带.与未凋亡的细胞比较,凋亡细胞核基质蛋白中HSP70和HSC70表达明显上调;VP-16作用2、3及4h细胞总蛋白中HSP70的表达随时间延长略显增加;诱导22?h比诱导4?h时去除VP-16后孵至22?h凋亡细胞总蛋白HSP70表达量增强了3.4倍. 结论 1.HL-60细胞早期凋亡形态出现在DNA梯状条带形成之前.2.凋亡细胞核基质中HSP70、HSC70的表达明显增加,经2、3及4?h作用的细胞总蛋白中HSP70表达差异不显著.这提示细胞凋亡后HSP70的活性位点主要位于核基质上.3.VP-16作用细胞时间增长至22?h,HSP的保护作用可能消失.
目的研究VP-16誘導HL-60細胞凋亡的變化特點以及凋亡細胞及覈基質中熱休剋蛋白(HSP)錶達的變化. 方法瓊脂糖凝膠電泳觀察凋亡細胞基因組DNA斷裂;TUNEL法觀察凋亡細胞的形態學變化;用免疫印跡方法顯示凋亡細胞覈基質蛋白、細胞總蛋白中HSP錶達的差異. 結果 VP-16作用HL-60細胞0.5?h齣現早期凋亡特徵.作用4?h可見明顯的DNA梯狀條帶.與未凋亡的細胞比較,凋亡細胞覈基質蛋白中HSP70和HSC70錶達明顯上調;VP-16作用2、3及4h細胞總蛋白中HSP70的錶達隨時間延長略顯增加;誘導22?h比誘導4?h時去除VP-16後孵至22?h凋亡細胞總蛋白HSP70錶達量增彊瞭3.4倍. 結論 1.HL-60細胞早期凋亡形態齣現在DNA梯狀條帶形成之前.2.凋亡細胞覈基質中HSP70、HSC70的錶達明顯增加,經2、3及4?h作用的細胞總蛋白中HSP70錶達差異不顯著.這提示細胞凋亡後HSP70的活性位點主要位于覈基質上.3.VP-16作用細胞時間增長至22?h,HSP的保護作用可能消失.
목적연구VP-16유도HL-60세포조망적변화특점이급조망세포급핵기질중열휴극단백(HSP)표체적변화. 방법경지당응효전영관찰조망세포기인조DNA단렬;TUNEL법관찰조망세포적형태학변화;용면역인적방법현시조망세포핵기질단백、세포총단백중HSP표체적차이. 결과 VP-16작용HL-60세포0.5?h출현조기조망특정.작용4?h가견명현적DNA제상조대.여미조망적세포비교,조망세포핵기질단백중HSP70화HSC70표체명현상조;VP-16작용2、3급4h세포총단백중HSP70적표체수시간연장략현증가;유도22?h비유도4?h시거제VP-16후부지22?h조망세포총단백HSP70표체량증강료3.4배. 결론 1.HL-60세포조기조망형태출현재DNA제상조대형성지전.2.조망세포핵기질중HSP70、HSC70적표체명현증가,경2、3급4?h작용적세포총단백중HSP70표체차이불현저.저제시세포조망후HSP70적활성위점주요위우핵기질상.3.VP-16작용세포시간증장지22?h,HSP적보호작용가능소실.
