第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
1期
12-14
,共3页
王孟龙%殷正丰%吴宗娣%王率%吴孟超
王孟龍%慇正豐%吳宗娣%王率%吳孟超
왕맹룡%은정봉%오종제%왕솔%오맹초
血管内皮生长因子%单纯疱疹病毒胸苷激酶%腺病毒%肝癌细胞
血管內皮生長因子%單純皰疹病毒胸苷激酶%腺病毒%肝癌細胞
혈관내피생장인자%단순포진병독흉감격매%선병독%간암세포
目的:构建携带受血管内皮生长因子(VEGF)启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)的重组腺病毒载体,并探讨该重组腺病毒对体外培养的肝癌细胞的特异性杀伤活性.方法:采用AdEasy System 构建携带受VEGF启动子或巨细胞病毒(CMV)启动子调控tk基因表达的AdVEGF-tk和AdCMV-tk,这两种重组腺病毒载体在293细胞中包装、扩增后,体外感染正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,并用不同浓度的丙氧鸟苷(GCV)处理后以MTT法检测受染细胞的增殖情况.结果:AdVEGF-tk的病毒滴度为1×1010 pfu/ml,AdCMV-tk为5×1010 pfu/ml.L02细胞感染AdVEGF-tk后对GCV的敏感性无明显改变,而HepG2细胞感染AdVEGF-tk后对GCV的敏感性明显增加,在感染复数(MOI)为100并用50 μg/ml GCV处理时,则有90% 以上HepG2细胞被杀死;而AdCMV-tk可杀死95% HepG2细胞和80% 以上L02细胞.结论:VEGF启动子调控的HSV-tk基因表达可特异性地杀死肝癌细胞,同时对正常肝细胞几无影响.
目的:構建攜帶受血管內皮生長因子(VEGF)啟動子調控的單純皰疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)的重組腺病毒載體,併探討該重組腺病毒對體外培養的肝癌細胞的特異性殺傷活性.方法:採用AdEasy System 構建攜帶受VEGF啟動子或巨細胞病毒(CMV)啟動子調控tk基因錶達的AdVEGF-tk和AdCMV-tk,這兩種重組腺病毒載體在293細胞中包裝、擴增後,體外感染正常肝細胞繫L02和肝癌細胞繫HepG2,併用不同濃度的丙氧鳥苷(GCV)處理後以MTT法檢測受染細胞的增殖情況.結果:AdVEGF-tk的病毒滴度為1×1010 pfu/ml,AdCMV-tk為5×1010 pfu/ml.L02細胞感染AdVEGF-tk後對GCV的敏感性無明顯改變,而HepG2細胞感染AdVEGF-tk後對GCV的敏感性明顯增加,在感染複數(MOI)為100併用50 μg/ml GCV處理時,則有90% 以上HepG2細胞被殺死;而AdCMV-tk可殺死95% HepG2細胞和80% 以上L02細胞.結論:VEGF啟動子調控的HSV-tk基因錶達可特異性地殺死肝癌細胞,同時對正常肝細胞幾無影響.
목적:구건휴대수혈관내피생장인자(VEGF)계동자조공적단순포진병독흉감격매기인(HSV-tk)적중조선병독재체,병탐토해중조선병독대체외배양적간암세포적특이성살상활성.방법:채용AdEasy System 구건휴대수VEGF계동자혹거세포병독(CMV)계동자조공tk기인표체적AdVEGF-tk화AdCMV-tk,저량충중조선병독재체재293세포중포장、확증후,체외감염정상간세포계L02화간암세포계HepG2,병용불동농도적병양조감(GCV)처리후이MTT법검측수염세포적증식정황.결과:AdVEGF-tk적병독적도위1×1010 pfu/ml,AdCMV-tk위5×1010 pfu/ml.L02세포감염AdVEGF-tk후대GCV적민감성무명현개변,이HepG2세포감염AdVEGF-tk후대GCV적민감성명현증가,재감염복수(MOI)위100병용50 μg/ml GCV처리시,칙유90% 이상HepG2세포피살사;이AdCMV-tk가살사95% HepG2세포화80% 이상L02세포.결론:VEGF계동자조공적HSV-tk기인표체가특이성지살사간암세포,동시대정상간세포궤무영향.
