中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
4期
284-287
,共4页
文力%王革非%冷武军%王贞慧%杨光
文力%王革非%冷武軍%王貞慧%楊光
문력%왕혁비%랭무군%왕정혜%양광
甲状旁腺素%基因合成%融合表达
甲狀徬腺素%基因閤成%融閤錶達
갑상방선소%기인합성%융합표체
目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测.方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体.结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Western blot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽.结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株.表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽.
目的構建重組人甲狀徬腺素N-耑34(PTH34)肽的大腸桿菌融閤錶達菌株,併對其錶達產物進行檢測.方法選用大腸桿菌偏愛密碼子,設計優化的人甲狀徬腺素N-耑34肽基因序列,通過6箇DNA片段分段閤成、片段連接、PCR擴增,經TA剋隆到pMD18載體中,經測序驗證,構建GST融閤錶達載體.結果經SDS-PAGE檢測PTH(1-34)肽與GST蛋白的融閤錶達,經Western blot分析具有免疫活性,通過GST親和層析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白電泳可檢測到PTH(1-34)肽.結論已穫得瞭能錶達GST-PTH(1-34)融閤蛋白的菌株.錶達產物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽.
목적구건중조인갑상방선소N-단34(PTH34)태적대장간균융합표체균주,병대기표체산물진행검측.방법선용대장간균편애밀마자,설계우화적인갑상방선소N-단34태기인서렬,통과6개DNA편단분단합성、편단련접、PCR확증,경TA극륭도pMD18재체중,경측서험증,구건GST융합표체재체.결과경SDS-PAGE검측PTH(1-34)태여GST단백적융합표체,경Western blot분석구유면역활성,통과GST친화층석화Xa인자매절,이용소분자단백전영가검측도PTH(1-34)태.결론이획득료능표체GST-PTH(1-34)융합단백적균주.표체산물구유면역활성,차능피Xa인자소화득도PTH(1-34)태.
