临床耳鼻咽喉科杂志
臨床耳鼻嚥喉科雜誌
림상이비인후과잡지
LINCHUANG ER-BL-YANHOUKE ZAZHL
2005年
21期
992-995
,共4页
池花明%陶泽璋%陈始明%肖伯奎%詹汉章
池花明%陶澤璋%陳始明%肖伯奎%詹漢章
지화명%도택장%진시명%초백규%첨한장
端粒酶逆转录酶%基因表达%喉肿瘤%C-myc蛋白
耑粒酶逆轉錄酶%基因錶達%喉腫瘤%C-myc蛋白
단립매역전록매%기인표체%후종류%C-myc단백
目的:探讨应用RNA干扰技术抑制Hep-2细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对C-myc蛋白表达的影响.方法:根据hTERT cDNA序列构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA1,随机选取一段与人类基因无同源性的碱基序列构建表达shRNA的含荧光素基因的对照质粒pshRNA2,采用METAFECTENE作为转染试剂.分别以质粒pshRNA1、pshRNA2及空白培养液处理喉癌Hep-2细胞.应用RT-PCR法检测hTERT基因的表达,Western Blot法检测hTERT和C-myc蛋白表达水平.结果:质粒pshRNA1转染组hTERT mRNA及蛋白表达水平显著低于其他处理组及空白对照组(P＜0.05);质粒pshRNA1转染组C-myc蛋白表达水平显著高于其他处理组及空白对照组(P＜0.01).结论:RNA干扰抑制人端粒酶逆转录酶活性使喉癌Hep-2细胞C-myc蛋白表达升高,其确切的机制有待进一步研究.
目的:探討應用RNA榦擾技術抑製Hep-2細胞人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)基因對C-myc蛋白錶達的影響.方法:根據hTERT cDNA序列構建錶達hTERT mRNA特異的、含熒光素基因的shRNA真覈錶達質粒pshRNA1,隨機選取一段與人類基因無同源性的堿基序列構建錶達shRNA的含熒光素基因的對照質粒pshRNA2,採用METAFECTENE作為轉染試劑.分彆以質粒pshRNA1、pshRNA2及空白培養液處理喉癌Hep-2細胞.應用RT-PCR法檢測hTERT基因的錶達,Western Blot法檢測hTERT和C-myc蛋白錶達水平.結果:質粒pshRNA1轉染組hTERT mRNA及蛋白錶達水平顯著低于其他處理組及空白對照組(P＜0.05);質粒pshRNA1轉染組C-myc蛋白錶達水平顯著高于其他處理組及空白對照組(P＜0.01).結論:RNA榦擾抑製人耑粒酶逆轉錄酶活性使喉癌Hep-2細胞C-myc蛋白錶達升高,其確切的機製有待進一步研究.
목적:탐토응용RNA간우기술억제Hep-2세포인단립매역전록매(hTERT)기인대C-myc단백표체적영향.방법:근거hTERT cDNA서렬구건표체hTERT mRNA특이적、함형광소기인적shRNA진핵표체질립pshRNA1,수궤선취일단여인류기인무동원성적감기서렬구건표체shRNA적함형광소기인적대조질립pshRNA2,채용METAFECTENE작위전염시제.분별이질립pshRNA1、pshRNA2급공백배양액처리후암Hep-2세포.응용RT-PCR법검측hTERT기인적표체,Western Blot법검측hTERT화C-myc단백표체수평.결과:질립pshRNA1전염조hTERT mRNA급단백표체수평현저저우기타처리조급공백대조조(P＜0.05);질립pshRNA1전염조C-myc단백표체수평현저고우기타처리조급공백대조조(P＜0.01).결론:RNA간우억제인단립매역전록매활성사후암Hep-2세포C-myc단백표체승고,기학절적궤제유대진일보연구.
