西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
1期
79-83,92
,共6页
刘战民%陆兆新%吕凤霞%别小妹%赵海珍
劉戰民%陸兆新%呂鳳霞%彆小妹%趙海珍
류전민%륙조신%려봉하%별소매%조해진
毕赤酵母%原果胶酶%分离纯化
畢赤酵母%原果膠酶%分離純化
필적효모%원과효매%분리순화
采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法,对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化,测定了其分子质量,并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件.结果表明,硫酸铵的饱和度为70%时,可以使原果胶酶的回收率达到71.9%,比活力为1 096.35 U/mg;经Sephadex G75凝胶过滤,原果胶酶回收率达到57.6%,酶的比活力提高到3 762.40 U/mg;最佳离子交换条件为:0～0.5 mol/L NaCl(缓冲体系为NoAc-HAc,pH5.8)溶液线性洗脱、Sepharose Fast Flow离子交换层析分离,在该条件下酶的比活力提高到9 743.20 U/mg,纯度为粗酶液的18.91倍,达到了电泳级;SDS-PAGE电泳结果表明,其分子质量为43.17 ku.
採用硫痠銨分級沉澱、凝膠過濾和離子交換層析等方法,對畢赤酵母工程菌髮酵液中的原果膠酶進行瞭分離純化,測定瞭其分子質量,併確定瞭離子交換層析法的最佳離子交換條件.結果錶明,硫痠銨的飽和度為70%時,可以使原果膠酶的迴收率達到71.9%,比活力為1 096.35 U/mg;經Sephadex G75凝膠過濾,原果膠酶迴收率達到57.6%,酶的比活力提高到3 762.40 U/mg;最佳離子交換條件為:0～0.5 mol/L NaCl(緩遲體繫為NoAc-HAc,pH5.8)溶液線性洗脫、Sepharose Fast Flow離子交換層析分離,在該條件下酶的比活力提高到9 743.20 U/mg,純度為粗酶液的18.91倍,達到瞭電泳級;SDS-PAGE電泳結果錶明,其分子質量為43.17 ku.
채용류산안분급침정、응효과려화리자교환층석등방법,대필적효모공정균발효액중적원과효매진행료분리순화,측정료기분자질량,병학정료리자교환층석법적최가리자교환조건.결과표명,류산안적포화도위70%시,가이사원과효매적회수솔체도71.9%,비활력위1 096.35 U/mg;경Sephadex G75응효과려,원과효매회수솔체도57.6%,매적비활력제고도3 762.40 U/mg;최가리자교환조건위:0～0.5 mol/L NaCl(완충체계위NoAc-HAc,pH5.8)용액선성세탈、Sepharose Fast Flow리자교환층석분리,재해조건하매적비활력제고도9 743.20 U/mg,순도위조매액적18.91배,체도료전영급;SDS-PAGE전영결과표명,기분자질량위43.17 ku.
