中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
5期
68-73
,共6页
王芹芹%陈旭生%Pieter Bas Kwak%邱承祥%刘飞%马晓杰%杨志敏
王芹芹%陳旭生%Pieter Bas Kwak%邱承祥%劉飛%馬曉傑%楊誌敏
왕근근%진욱생%Pieter Bas Kwak%구승상%류비%마효걸%양지민
陆地棉%纤维发育%miRNA%直接克隆法%鉴定
陸地棉%纖維髮育%miRNA%直接剋隆法%鑒定
륙지면%섬유발육%miRNA%직접극륭법%감정
microRNA(miRNA)是生物中一类起负调控作用的非编码的小分子RNA,主要在转录后水平上调节生物体的生长与发育.直接克隆法是鉴定植物中miRNA最常用也是最有效的方法之一.利用直接克隆法分离了陆地棉开花后0-10 d(days post anthesis,DPA)胚珠中总RNA,从中筛选17～24 nt小分子RNA构建cDNA文库,对初筛得到的阳性克隆进行测序.通过与miRNA数据库比对,最终获得4个保守的miRNA.进一步对他们的转录表达进行分析,发现所有miRNA在棉花胚珠纤维不同发育时期均能表达.其中miR167a、miR172c和miR394b在棉花幼苗的根茎叶中有不同程度的表达.预测得到55个miRNA的靶基因,多数靶基因编码转录因子、代谢酶类以及发育相关蛋白,进一步证明miRNA参与调控棉花纤维的形态建成、发育等各项生理活动.
microRNA(miRNA)是生物中一類起負調控作用的非編碼的小分子RNA,主要在轉錄後水平上調節生物體的生長與髮育.直接剋隆法是鑒定植物中miRNA最常用也是最有效的方法之一.利用直接剋隆法分離瞭陸地棉開花後0-10 d(days post anthesis,DPA)胚珠中總RNA,從中篩選17～24 nt小分子RNA構建cDNA文庫,對初篩得到的暘性剋隆進行測序.通過與miRNA數據庫比對,最終穫得4箇保守的miRNA.進一步對他們的轉錄錶達進行分析,髮現所有miRNA在棉花胚珠纖維不同髮育時期均能錶達.其中miR167a、miR172c和miR394b在棉花幼苗的根莖葉中有不同程度的錶達.預測得到55箇miRNA的靶基因,多數靶基因編碼轉錄因子、代謝酶類以及髮育相關蛋白,進一步證明miRNA參與調控棉花纖維的形態建成、髮育等各項生理活動.
microRNA(miRNA)시생물중일류기부조공작용적비편마적소분자RNA,주요재전록후수평상조절생물체적생장여발육.직접극륭법시감정식물중miRNA최상용야시최유효적방법지일.이용직접극륭법분리료륙지면개화후0-10 d(days post anthesis,DPA)배주중총RNA,종중사선17～24 nt소분자RNA구건cDNA문고,대초사득도적양성극륭진행측서.통과여miRNA수거고비대,최종획득4개보수적miRNA.진일보대타문적전록표체진행분석,발현소유miRNA재면화배주섬유불동발육시기균능표체.기중miR167a、miR172c화miR394b재면화유묘적근경협중유불동정도적표체.예측득도55개miRNA적파기인,다수파기인편마전록인자、대사매류이급발육상관단백,진일보증명miRNA삼여조공면화섬유적형태건성、발육등각항생리활동.
