CAJ | 학술논문

目的:制备小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEFs)滋养层,用于诱导性多潜能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)的体外培养.方法:取13.5～15.5天胎龄的胎鼠,采用组织消化法分离原代培养成纤维细胞,对MEFs的生长形态,生长曲线进行观察.采用10μg/ml丝裂霉素C预处理P2～P3代MEFs2～3h制备出细胞滋养层,在该滋养层上进行iPSCs培养,观察iPSCs的集落生成情况,并行碱性磷酸酶细胞染色.结果:MEFs经丝裂霉素C预处理后细胞既不增殖,也不会死亡,仍保持分泌多种生长因子的能力.iPSCs在MEFs滋养层上生长良好,类似于胚胎干细胞一样能形成"鸟巢"状集落,并可维持iPSCs正常形态,抑制其分化而不影响活力,碱性磷酸酶染色阳性.结论:利用诱导性多潜能干细胞滋养层方法制备的细胞滋养层,能有效支持iPSCs的生长,为进一步开展iPSCs的研究提供了理论依据和实验基础.
목적:제비소서배태성섬유세포(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEFs)자양층,용우유도성다잠능간세포(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)적체외배양.방법:취13.5～15.5천태령적태서,채용조직소화법분리원대배양성섬유세포,대MEFs적생장형태,생장곡선진행관찰.채용10μg/ml사렬매소C예처리P2～P3대MEFs2～3h제비출세포자양층,재해자양층상진행iPSCs배양,관찰iPSCs적집락생성정황,병행감성린산매세포염색.결과:MEFs경사렬매소C예처리후세포기불증식,야불회사망,잉보지분비다충생장인자적능력.iPSCs재MEFs자양층상생장량호,유사우배태간세포일양능형성"조소"상집락,병가유지iPSCs정상형태,억제기분화이불영향활력,감성린산매염색양성.결론:이용유도성다잠능간세포자양층방법제비적세포자양층,능유효지지iPSCs적생장,위진일보개전iPSCs적연구제공료이론의거화실험기출.