林业科学研究
林業科學研究
임업과학연구
FOREST RESEARCH
2011年
3期
334-339
,共6页
刘海涛%周静%张川红%冯锦霞%郑勇奇
劉海濤%週靜%張川紅%馮錦霞%鄭勇奇
류해도%주정%장천홍%풍금하%정용기
抗虫转基因%欧洲黑杨%多重PCR检测%外源基因
抗蟲轉基因%歐洲黑楊%多重PCR檢測%外源基因
항충전기인%구주흑양%다중PCR검측%외원기인
根据抗虫转基因欧洲黑杨中的CaMV 35S启动子、NOS终止子、NPTⅡ标记基因以及Bt目的基因序列,设计合成了相应引物,采用单重PCR和多重PCR技术对启动子、终止子、选择标记基因以及目的基因等多个外源基因进行检测,并对各引物的退火温度及引物之间的浓度配比进行优化,建立了适用于抗虫转基因欧洲黑杨检测的Bt、NPTⅡ和NOS基因的三重PCR分析的技术体系.结果表明:当各组引物的终浓度配比为1.0:0.5:0.5,退火温度为59℃时,所建立的三重PCR检测体系能够有效地检测出抗虫转基因欧洲黑杨中的转基因成分,实现了对抗虫转基因欧洲黑杨的快速、高效、准确的鉴定.
根據抗蟲轉基因歐洲黑楊中的CaMV 35S啟動子、NOS終止子、NPTⅡ標記基因以及Bt目的基因序列,設計閤成瞭相應引物,採用單重PCR和多重PCR技術對啟動子、終止子、選擇標記基因以及目的基因等多箇外源基因進行檢測,併對各引物的退火溫度及引物之間的濃度配比進行優化,建立瞭適用于抗蟲轉基因歐洲黑楊檢測的Bt、NPTⅡ和NOS基因的三重PCR分析的技術體繫.結果錶明:噹各組引物的終濃度配比為1.0:0.5:0.5,退火溫度為59℃時,所建立的三重PCR檢測體繫能夠有效地檢測齣抗蟲轉基因歐洲黑楊中的轉基因成分,實現瞭對抗蟲轉基因歐洲黑楊的快速、高效、準確的鑒定.
근거항충전기인구주흑양중적CaMV 35S계동자、NOS종지자、NPTⅡ표기기인이급Bt목적기인서렬,설계합성료상응인물,채용단중PCR화다중PCR기술대계동자、종지자、선택표기기인이급목적기인등다개외원기인진행검측,병대각인물적퇴화온도급인물지간적농도배비진행우화,건립료괄용우항충전기인구주흑양검측적Bt、NPTⅡ화NOS기인적삼중PCR분석적기술체계.결과표명:당각조인물적종농도배비위1.0:0.5:0.5,퇴화온도위59℃시,소건립적삼중PCR검측체계능구유효지검측출항충전기인구주흑양중적전기인성분,실현료대항충전기인구주흑양적쾌속、고효、준학적감정.
