军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2012年
4期
299-303
,共5页
彭贤慧%刘琪琦%陈苏红%刘志红%张敏丽%宋宏彬%王升启
彭賢慧%劉琪琦%陳囌紅%劉誌紅%張敏麗%宋宏彬%王升啟
팽현혜%류기기%진소홍%류지홍%장민려%송굉빈%왕승계
肠道病毒%基因芯片%多重不对称PCR%可视化
腸道病毒%基因芯片%多重不對稱PCR%可視化
장도병독%기인심편%다중불대칭PCR%가시화
目的 建立一种能同时检测10种肠道病毒的可视化基因芯片法.方法 根据公开发表的10种常见肠道病毒的序列,设计病毒引物和探针,制备肠道病毒检测基因芯片.利用多重不对称PCR法扩增样品中的病毒靶片段,标记产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、可视化显色后进行结果分析.在优化的RT-PCR体系、杂交反应和可视化检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏度和重复性.结果 本研究共筛选出2对通用引物、3对特异性引物和1条肠道病毒属通用探针、9条特异性检测探针.该芯片具有较好的特异性和重复性,可检测出不低于102 拷贝/μl的体外转录RNA.30例临床标本的芯片检测结果与荧光PCR法一致.结论 本研究所建立的方法具有高通量、高特异性、高灵敏度等特点,因此在临床上具有潜在的应用前景,可以为肠道病毒诊断提供实验室依据.
目的 建立一種能同時檢測10種腸道病毒的可視化基因芯片法.方法 根據公開髮錶的10種常見腸道病毒的序列,設計病毒引物和探針,製備腸道病毒檢測基因芯片.利用多重不對稱PCR法擴增樣品中的病毒靶片段,標記產物與基因芯片上的探針雜交,經清洗、可視化顯色後進行結果分析.在優化的RT-PCR體繫、雜交反應和可視化檢測條件下,評價芯片的特異性、靈敏度和重複性.結果 本研究共篩選齣2對通用引物、3對特異性引物和1條腸道病毒屬通用探針、9條特異性檢測探針.該芯片具有較好的特異性和重複性,可檢測齣不低于102 拷貝/μl的體外轉錄RNA.30例臨床標本的芯片檢測結果與熒光PCR法一緻.結論 本研究所建立的方法具有高通量、高特異性、高靈敏度等特點,因此在臨床上具有潛在的應用前景,可以為腸道病毒診斷提供實驗室依據.
목적 건립일충능동시검측10충장도병독적가시화기인심편법.방법 근거공개발표적10충상견장도병독적서렬,설계병독인물화탐침,제비장도병독검측기인심편.이용다중불대칭PCR법확증양품중적병독파편단,표기산물여기인심편상적탐침잡교,경청세、가시화현색후진행결과분석.재우화적RT-PCR체계、잡교반응화가시화검측조건하,평개심편적특이성、령민도화중복성.결과 본연구공사선출2대통용인물、3대특이성인물화1조장도병독속통용탐침、9조특이성검측탐침.해심편구유교호적특이성화중복성,가검측출불저우102 고패/μl적체외전록RNA.30례림상표본적심편검측결과여형광PCR법일치.결론 본연구소건립적방법구유고통량、고특이성、고령민도등특점,인차재림상상구유잠재적응용전경,가이위장도병독진단제공실험실의거.
