中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
7期
171-177
,共7页
淦志兵%李美芽%施春雷%史贤明
淦誌兵%李美芽%施春雷%史賢明
감지병%리미아%시춘뢰%사현명
原壳小球藻%抗生素%选择标记%基因工程
原殼小毬藻%抗生素%選擇標記%基因工程
원각소구조%항생소%선택표기%기인공정
目的:评价原壳小球藻对6种常用抗生素的敏感性,找到合适的抗生素作为藻株遗传改造的抗性标记.方法:在固体培养基中筛选最适合用于原壳小球藻筛选的抗生素,然后在液体培养基中加入不同浓度的抗生素,分别在第4天,第7天,第14天和第21天测定藻液的OD440值并计算抗生素对藻的生长抑制率(P%).根据抑制率(P%)与抗生素浓度(C)的关系来评估原壳小球藻对抗生素的敏感性.结果:经过2周的筛选试验,在固体培养基中,潮霉素的致死剂量为20μg/mL,链霉素、卡那霉素、壮观霉素、氯霉素的致死剂量分别超过100、500、100、600 ug/mL.而在G418质量浓度为5ug/mL时,原壳小球藻的生长就受到显著的抑制;当质量浓度为10 ug/mL时已经完全抑制了原壳小球藻的生长,因此,对于G418而言,10 ug/mL是原壳小球藻生长的致死剂量.在液体培养基中,G418的作用剂量与固体培养基中的剂量一致,并且5ug/mL对原壳小球藻生长的抑制率维持在80%以上,10ug/mL对原壳小球藻生长的抑制率维持在95%左右.结论:原壳小球藻对氯霉素不敏感,对卡那霉素、链霉素、壮观霉素较为敏感,对潮霉素表现出高度敏感性,对G418最敏感.与其它5种抗生素相比,G418更适合作为原壳小球藻遗传转化的抗生素抗性选择标记.
目的:評價原殼小毬藻對6種常用抗生素的敏感性,找到閤適的抗生素作為藻株遺傳改造的抗性標記.方法:在固體培養基中篩選最適閤用于原殼小毬藻篩選的抗生素,然後在液體培養基中加入不同濃度的抗生素,分彆在第4天,第7天,第14天和第21天測定藻液的OD440值併計算抗生素對藻的生長抑製率(P%).根據抑製率(P%)與抗生素濃度(C)的關繫來評估原殼小毬藻對抗生素的敏感性.結果:經過2週的篩選試驗,在固體培養基中,潮黴素的緻死劑量為20μg/mL,鏈黴素、卡那黴素、壯觀黴素、氯黴素的緻死劑量分彆超過100、500、100、600 ug/mL.而在G418質量濃度為5ug/mL時,原殼小毬藻的生長就受到顯著的抑製;噹質量濃度為10 ug/mL時已經完全抑製瞭原殼小毬藻的生長,因此,對于G418而言,10 ug/mL是原殼小毬藻生長的緻死劑量.在液體培養基中,G418的作用劑量與固體培養基中的劑量一緻,併且5ug/mL對原殼小毬藻生長的抑製率維持在80%以上,10ug/mL對原殼小毬藻生長的抑製率維持在95%左右.結論:原殼小毬藻對氯黴素不敏感,對卡那黴素、鏈黴素、壯觀黴素較為敏感,對潮黴素錶現齣高度敏感性,對G418最敏感.與其它5種抗生素相比,G418更適閤作為原殼小毬藻遺傳轉化的抗生素抗性選擇標記.
목적:평개원각소구조대6충상용항생소적민감성,조도합괄적항생소작위조주유전개조적항성표기.방법:재고체배양기중사선최괄합용우원각소구조사선적항생소,연후재액체배양기중가입불동농도적항생소,분별재제4천,제7천,제14천화제21천측정조액적OD440치병계산항생소대조적생장억제솔(P%).근거억제솔(P%)여항생소농도(C)적관계래평고원각소구조대항생소적민감성.결과:경과2주적사선시험,재고체배양기중,조매소적치사제량위20μg/mL,련매소、잡나매소、장관매소、록매소적치사제량분별초과100、500、100、600 ug/mL.이재G418질량농도위5ug/mL시,원각소구조적생장취수도현저적억제;당질량농도위10 ug/mL시이경완전억제료원각소구조적생장,인차,대우G418이언,10 ug/mL시원각소구조생장적치사제량.재액체배양기중,G418적작용제량여고체배양기중적제량일치,병차5ug/mL대원각소구조생장적억제솔유지재80%이상,10ug/mL대원각소구조생장적억제솔유지재95%좌우.결론:원각소구조대록매소불민감,대잡나매소、련매소、장관매소교위민감,대조매소표현출고도민감성,대G418최민감.여기타5충항생소상비,G418경괄합작위원각소구조유전전화적항생소항성선택표기.