寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2004年
4期
193-197
,共5页
蔺亚晖%韩志富%李会良%张玲%王恒
藺亞暉%韓誌富%李會良%張玲%王恆
린아휘%한지부%리회량%장령%왕항
Pydyn基因%内含子%P.yoelii yoelii
Pydyn基因%內含子%P.yoelii yoelii
Pydyn기인%내함자%P.yoelii yoelii
本研究测定并分析鼠约氏疟原虫(Plasmodium yoelii yoelii)动力素蛋白基因(Pydyn)3'端内含子序列,比较约氏疟原虫yoelii虫株的Pydyn基因与约氏疟原虫17X NL虫株基因组序列内含子间序列的多态性.方法:应用PCR技术扩增约氏疟原虫动力素蛋白基因(Pydyn)基因组3'端序列,将其克隆人pGEM-T Easy载体.阳性克隆经酶切和PCR鉴定正确后测序,并用分子生物学WINSTAR软件进行基因结构和同源性分析.结果:用PCR方法成功扩增出约800bp的Pydyn基因特定片段,阳性克隆经酶切及PCR扩增确定.基因序列分析表明,约氏疟原虫yoelii虫株的Pydyn基因含有3个内含子,并且与约氏疟原虫17X NL虫株基因组序列在内含子间存在着几个变异.结论:确定了鼠约氏疟原虫动力素蛋白基因(Pydyn)3'端内含子序列,其内含子具有序列短且AT含量较高的特点,两末端的碱基具有一般真核基因内含子共有的剪接位点.多态性分析表明,将约氏疟原虫yoelii虫株的Pydyn基因的3个内含子与人恶性疟原虫动力素基因Pfdyn内含子保守序列相比,Pydyn基因内含子上游下游序列具有一定的同源性.另外,约氏疟原虫yoelii虫株与约氏疟原虫17XNL虫株的内含子间存在着多态性,存在着几个变异,这些变异属于点突变.
本研究測定併分析鼠約氏瘧原蟲(Plasmodium yoelii yoelii)動力素蛋白基因(Pydyn)3'耑內含子序列,比較約氏瘧原蟲yoelii蟲株的Pydyn基因與約氏瘧原蟲17X NL蟲株基因組序列內含子間序列的多態性.方法:應用PCR技術擴增約氏瘧原蟲動力素蛋白基因(Pydyn)基因組3'耑序列,將其剋隆人pGEM-T Easy載體.暘性剋隆經酶切和PCR鑒定正確後測序,併用分子生物學WINSTAR軟件進行基因結構和同源性分析.結果:用PCR方法成功擴增齣約800bp的Pydyn基因特定片段,暘性剋隆經酶切及PCR擴增確定.基因序列分析錶明,約氏瘧原蟲yoelii蟲株的Pydyn基因含有3箇內含子,併且與約氏瘧原蟲17X NL蟲株基因組序列在內含子間存在著幾箇變異.結論:確定瞭鼠約氏瘧原蟲動力素蛋白基因(Pydyn)3'耑內含子序列,其內含子具有序列短且AT含量較高的特點,兩末耑的堿基具有一般真覈基因內含子共有的剪接位點.多態性分析錶明,將約氏瘧原蟲yoelii蟲株的Pydyn基因的3箇內含子與人噁性瘧原蟲動力素基因Pfdyn內含子保守序列相比,Pydyn基因內含子上遊下遊序列具有一定的同源性.另外,約氏瘧原蟲yoelii蟲株與約氏瘧原蟲17XNL蟲株的內含子間存在著多態性,存在著幾箇變異,這些變異屬于點突變.
본연구측정병분석서약씨학원충(Plasmodium yoelii yoelii)동력소단백기인(Pydyn)3'단내함자서렬,비교약씨학원충yoelii충주적Pydyn기인여약씨학원충17X NL충주기인조서렬내함자간서렬적다태성.방법:응용PCR기술확증약씨학원충동력소단백기인(Pydyn)기인조3'단서렬,장기극륭인pGEM-T Easy재체.양성극륭경매절화PCR감정정학후측서,병용분자생물학WINSTAR연건진행기인결구화동원성분석.결과:용PCR방법성공확증출약800bp적Pydyn기인특정편단,양성극륭경매절급PCR확증학정.기인서렬분석표명,약씨학원충yoelii충주적Pydyn기인함유3개내함자,병차여약씨학원충17X NL충주기인조서렬재내함자간존재착궤개변이.결론:학정료서약씨학원충동력소단백기인(Pydyn)3'단내함자서렬,기내함자구유서렬단차AT함량교고적특점,량말단적감기구유일반진핵기인내함자공유적전접위점.다태성분석표명,장약씨학원충yoelii충주적Pydyn기인적3개내함자여인악성학원충동력소기인Pfdyn내함자보수서렬상비,Pydyn기인내함자상유하유서렬구유일정적동원성.령외,약씨학원충yoelii충주여약씨학원충17XNL충주적내함자간존재착다태성,존재착궤개변이,저사변이속우점돌변.