CAJ | 학술논문

目的建立表达KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型,并观察转染细胞的生物学活性.方法从新鲜肌肉组织中提取总RNA,采取逆转录PCR得到人KIAA1173基因cDNA.获得的人KIAA1173基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),进行酶切和序列鉴定.将重组质粒pcDNA3.1(+)-KIAA1173和空载体利用阳离子脂质体介导转入鼻咽癌6-10B细胞,经G418筛选阳性克隆.用RT-PCR、原位杂交及免疫细胞化学等方法检测KIAA1173基因在6-10B细胞中的稳定表达情况,并通过MTT法、肿瘤细胞侵袭实验及裸鼠体内成瘤性实验方法,检测KIAA1173基因对鼻咽癌细胞的增殖、侵袭及成瘤能力的影响.以空白质粒转染组作为对照.结果在mRNA和蛋白水平证实,转染细胞内有KIAA1173基因的高表达,表明细胞可表达人KIAA1173基因.6-10B在转染了pcDNA3.1(+)-KIAA1173后,较转染空载体pcDNA3.1(+),肿瘤细胞的增殖能力、侵袭能力及裸鼠体内成瘤能力明显降低(P＜0.05).结论结果提示KIAA1173基因可能是一鼻咽癌肿瘤抑制基因.获得生物学活性稳定的KIAA1173基因高表达的鼻咽癌细胞模型,为进一步研究奠定了基础.
목적건립표체KIAA1173기인적비인암6-10B세포모형,병관찰전염세포적생물학활성.방법종신선기육조직중제취총RNA,채취역전록PCR득도인KIAA1173기인cDNA.획득적인KIAA1173기인극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(+),진행매절화서렬감정.장중조질립pcDNA3.1(+)-KIAA1173화공재체이용양리자지질체개도전입비인암6-10B세포,경G418사선양성극륭.용RT-PCR、원위잡교급면역세포화학등방법검측KIAA1173기인재6-10B세포중적은정표체정황,병통과MTT법、종류세포침습실험급라서체내성류성실험방법,검측KIAA1173기인대비인암세포적증식、침습급성류능력적영향.이공백질립전염조작위대조.결과재mRNA화단백수평증실,전염세포내유KIAA1173기인적고표체,표명세포가표체인KIAA1173기인.6-10B재전염료pcDNA3.1(+)-KIAA1173후,교전염공재체pcDNA3.1(+),종류세포적증식능력、침습능력급라서체내성류능력명현강저(P＜0.05).결론결과제시KIAA1173기인가능시일비인암종류억제기인.획득생물학활성은정적KIAA1173기인고표체적비인암세포모형,위진일보연구전정료기출.