生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
9-11
,共3页
张健%陈苏宁%于江天%苏金%药立波%刘新平
張健%陳囌寧%于江天%囌金%藥立波%劉新平
장건%진소저%우강천%소금%약립파%류신평
NDRG2%启动子%转录调控
NDRG2%啟動子%轉錄調控
NDRG2%계동자%전록조공
目的:克隆人NDRG2的启动子,并进行启动子的活性鉴定.方法:用Advantage-GC Taq酶,采用PCR方法,以BCA克隆R-998D1为模板,克隆人NDRG2(-1455/+274)的启动子.分别构建NDRG2(-1131/+274)、NDRG2(-273/+274)、NDRG2(-135/+274)、NDRG2(-79/+274)和NDRG2(-79/+57)等不同长度的截短体,并分别亚克隆入pGL3-basic报告基因载体,测序鉴定.分别转染HEK293和HeLa细胞后,运用双荧光报告基因系统进行启动子活性分析,从而判断核心启动子的位置.结果:人NDRG2的启动子克隆成功,并构建了不同长度的截短体,DNA测序结果与报道一致.报告基因分析结果将人NDRG2启动子的核心区域定位于NDRG2(-79/+57).结论:随着人NDRG2的启动子的长度逐渐被截短,启动子的基础活性也逐渐降低,可将人NDRG2启动子的核心区域定位于NDRG2(-79/+57).
目的:剋隆人NDRG2的啟動子,併進行啟動子的活性鑒定.方法:用Advantage-GC Taq酶,採用PCR方法,以BCA剋隆R-998D1為模闆,剋隆人NDRG2(-1455/+274)的啟動子.分彆構建NDRG2(-1131/+274)、NDRG2(-273/+274)、NDRG2(-135/+274)、NDRG2(-79/+274)和NDRG2(-79/+57)等不同長度的截短體,併分彆亞剋隆入pGL3-basic報告基因載體,測序鑒定.分彆轉染HEK293和HeLa細胞後,運用雙熒光報告基因繫統進行啟動子活性分析,從而判斷覈心啟動子的位置.結果:人NDRG2的啟動子剋隆成功,併構建瞭不同長度的截短體,DNA測序結果與報道一緻.報告基因分析結果將人NDRG2啟動子的覈心區域定位于NDRG2(-79/+57).結論:隨著人NDRG2的啟動子的長度逐漸被截短,啟動子的基礎活性也逐漸降低,可將人NDRG2啟動子的覈心區域定位于NDRG2(-79/+57).
목적:극륭인NDRG2적계동자,병진행계동자적활성감정.방법:용Advantage-GC Taq매,채용PCR방법,이BCA극륭R-998D1위모판,극륭인NDRG2(-1455/+274)적계동자.분별구건NDRG2(-1131/+274)、NDRG2(-273/+274)、NDRG2(-135/+274)、NDRG2(-79/+274)화NDRG2(-79/+57)등불동장도적절단체,병분별아극륭입pGL3-basic보고기인재체,측서감정.분별전염HEK293화HeLa세포후,운용쌍형광보고기인계통진행계동자활성분석,종이판단핵심계동자적위치.결과:인NDRG2적계동자극륭성공,병구건료불동장도적절단체,DNA측서결과여보도일치.보고기인분석결과장인NDRG2계동자적핵심구역정위우NDRG2(-79/+57).결론:수착인NDRG2적계동자적장도축점피절단,계동자적기출활성야축점강저,가장인NDRG2계동자적핵심구역정위우NDRG2(-79/+57).
