临床血液学杂志（输血与检验版）
臨床血液學雜誌（輸血與檢驗版）
림상혈액학잡지（수혈여검험판）
JOURNAL OF CLINICAL HEMATOLOGY
2007年
6期
247-250
,共4页
胡丽华%汤兆明%李一荣%王琳%窦丽芳%熊娟
鬍麗華%湯兆明%李一榮%王琳%竇麗芳%熊娟
호려화%탕조명%리일영%왕림%두려방%웅연
血型A抗原%模拟多肽%融合蛋白
血型A抗原%模擬多肽%融閤蛋白
혈형A항원%모의다태%융합단백
目的:构建血型A抗原模拟多肽融合表达载体,初步鉴定融合表达蛋白结合抗A抗体的能力.方法:PCR扩增血型A抗原模拟多肽(P17)和谷胱苷肽S-转移酶(GST)编码基因,并连接成P17-GST.双酶切后克隆入原核表达质粒pET 28 b,酶切、测序鉴定.以BL21(DE3)为表达菌,在IPTG诱导下表达P17-GST融合蛋白,Ni-NTA柱纯化蛋白.红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力.结果:成功构建P17基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效表达,纯化的融合蛋白以浓度依赖的方式抑制A型红细胞的凝集作用.结论:血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白可特异性结合抗A抗体,具有替代血型A多糖抗原潜能,为发展新型的抗A抗体滤除材料提供了依据.
目的:構建血型A抗原模擬多肽融閤錶達載體,初步鑒定融閤錶達蛋白結閤抗A抗體的能力.方法:PCR擴增血型A抗原模擬多肽(P17)和穀胱苷肽S-轉移酶(GST)編碼基因,併連接成P17-GST.雙酶切後剋隆入原覈錶達質粒pET 28 b,酶切、測序鑒定.以BL21(DE3)為錶達菌,在IPTG誘導下錶達P17-GST融閤蛋白,Ni-NTA柱純化蛋白.紅細胞凝集抑製實驗分析融閤蛋白模擬血型A抗原的能力.結果:成功構建P17基因和GST基因融閤的原覈錶達質粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效錶達,純化的融閤蛋白以濃度依賴的方式抑製A型紅細胞的凝集作用.結論:血型A抗原的模擬多肽序列與GST的融閤錶達蛋白可特異性結閤抗A抗體,具有替代血型A多糖抗原潛能,為髮展新型的抗A抗體濾除材料提供瞭依據.
목적:구건혈형A항원모의다태융합표체재체,초보감정융합표체단백결합항A항체적능력.방법:PCR확증혈형A항원모의다태(P17)화곡광감태S-전이매(GST)편마기인,병련접성P17-GST.쌍매절후극륭입원핵표체질립pET 28 b,매절、측서감정.이BL21(DE3)위표체균,재IPTG유도하표체P17-GST융합단백,Ni-NTA주순화단백.홍세포응집억제실험분석융합단백모의혈형A항원적능력.결과:성공구건P17기인화GST기인융합적원핵표체질립pET28b-P17-GST,목적기인가이고효표체,순화적융합단백이농도의뢰적방식억제A형홍세포적응집작용.결론:혈형A항원적모의다태서렬여GST적융합표체단백가특이성결합항A항체,구유체대혈형A다당항원잠능,위발전신형적항A항체려제재료제공료의거.
