药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2008年
4期
371-377
,共7页
胥国强%黄文芳%刘华%杨永长%刘文
胥國彊%黃文芳%劉華%楊永長%劉文
서국강%황문방%류화%양영장%류문
辛伐他汀%内质网%应激%K562细胞%凋亡
辛伐他汀%內質網%應激%K562細胞%凋亡
신벌타정%내질망%응격%K562세포%조망
探讨内质网应激在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡中的作用.采用荧光显微镜观察凋亡细胞的形态变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+浓度,RT-PCR检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、钙蛋白酶(calpain)基因mRNA表达水平,Western blotting检测GRP78、calpain、caspase-3,-6,-7,-9,-12蛋白水平.结果显示,10、20、30 μmol.L-1辛伐他汀(simvastatin,Sim)作用K562细胞72 h后,细胞出现典型的凋亡形态,凋亡率分别为12.41%、19.08%和23.41%;细胞内Ca2+浓度增加,荧光强度分别为43、54和64;GRP78、calpain基因mRNA表达上调;calpain、caspase-3,-6,-7,-9,-12蛋白剪切活化、GRP78蛋白表达增强.以上结果表明,内质网作为细胞凋亡的重要途径参与了辛伐他汀诱导K562细胞的凋亡.辛伐他汀将可能被用于临床治疗白血病.
探討內質網應激在辛伐他汀誘導K562細胞凋亡中的作用.採用熒光顯微鏡觀察凋亡細胞的形態變化,Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡率,激光掃描共聚焦顯微鏡檢測細胞內Ca2+濃度,RT-PCR檢測葡萄糖調節蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、鈣蛋白酶(calpain)基因mRNA錶達水平,Western blotting檢測GRP78、calpain、caspase-3,-6,-7,-9,-12蛋白水平.結果顯示,10、20、30 μmol.L-1辛伐他汀(simvastatin,Sim)作用K562細胞72 h後,細胞齣現典型的凋亡形態,凋亡率分彆為12.41%、19.08%和23.41%;細胞內Ca2+濃度增加,熒光彊度分彆為43、54和64;GRP78、calpain基因mRNA錶達上調;calpain、caspase-3,-6,-7,-9,-12蛋白剪切活化、GRP78蛋白錶達增彊.以上結果錶明,內質網作為細胞凋亡的重要途徑參與瞭辛伐他汀誘導K562細胞的凋亡.辛伐他汀將可能被用于臨床治療白血病.
탐토내질망응격재신벌타정유도K562세포조망중적작용.채용형광현미경관찰조망세포적형태변화,Annexin V-FITC/PI쌍염법검측세포조망솔,격광소묘공취초현미경검측세포내Ca2+농도,RT-PCR검측포도당조절단백78(glucose regulated protein 78,GRP78)、개단백매(calpain)기인mRNA표체수평,Western blotting검측GRP78、calpain、caspase-3,-6,-7,-9,-12단백수평.결과현시,10、20、30 μmol.L-1신벌타정(simvastatin,Sim)작용K562세포72 h후,세포출현전형적조망형태,조망솔분별위12.41%、19.08%화23.41%;세포내Ca2+농도증가,형광강도분별위43、54화64;GRP78、calpain기인mRNA표체상조;calpain、caspase-3,-6,-7,-9,-12단백전절활화、GRP78단백표체증강.이상결과표명,내질망작위세포조망적중요도경삼여료신벌타정유도K562세포적조망.신벌타정장가능피용우림상치료백혈병.
