新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
5期
931-936
,共6页
简子健%马素贞%陶玉成%翟少华%赵森
簡子健%馬素貞%陶玉成%翟少華%趙森
간자건%마소정%도옥성%적소화%조삼
原核表达%表达条件优化%重组蛋白%生物活性
原覈錶達%錶達條件優化%重組蛋白%生物活性
원핵표체%표체조건우화%중조단백%생물활성
[目的]为了提高犬传染性肝炎Hexon蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,研究Hexon基因蛋白的最佳表达条件和表达蛋白的活性.[方法]在大肠杆菌菌株BL21(DE3)培养过程中,选择诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IFTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件观察对Hexon融合蛋白表达的影响,以确定最佳表达条件,并用Westem-blot检测重组蛋白的生物活性.[结果]大肠杆菌BL21(DE3)在37℃培养2.25h后,添加终浓度为2.0 mmol/L的IPTG,27℃培养8 h,Hexon重组蛋白表达量最高(1.67mg/mL),所表达的重组蛋白能与犬传染性肝炎阳性血清相结合.[结论]在高浓度IPTG诱导和冷培养条件下,Hexon蛋白基因的表达量最高,表达出的重组蛋白具有很好的反应原性,为进一步研究六邻体蛋白的作用机理及亚单位疫苗的研究提供了实验基础.
[目的]為瞭提高犬傳染性肝炎Hexon蛋白基因在大腸桿菌中的錶達量,研究Hexon基因蛋白的最佳錶達條件和錶達蛋白的活性.[方法]在大腸桿菌菌株BL21(DE3)培養過程中,選擇誘導劑(IPTG)的最佳加入時間、誘導劑(IFTG)濃度、誘導時間以及不同溫度條件觀察對Hexon融閤蛋白錶達的影響,以確定最佳錶達條件,併用Westem-blot檢測重組蛋白的生物活性.[結果]大腸桿菌BL21(DE3)在37℃培養2.25h後,添加終濃度為2.0 mmol/L的IPTG,27℃培養8 h,Hexon重組蛋白錶達量最高(1.67mg/mL),所錶達的重組蛋白能與犬傳染性肝炎暘性血清相結閤.[結論]在高濃度IPTG誘導和冷培養條件下,Hexon蛋白基因的錶達量最高,錶達齣的重組蛋白具有很好的反應原性,為進一步研究六鄰體蛋白的作用機理及亞單位疫苗的研究提供瞭實驗基礎.
[목적]위료제고견전염성간염Hexon단백기인재대장간균중적표체량,연구Hexon기인단백적최가표체조건화표체단백적활성.[방법]재대장간균균주BL21(DE3)배양과정중,선택유도제(IPTG)적최가가입시간、유도제(IFTG)농도、유도시간이급불동온도조건관찰대Hexon융합단백표체적영향,이학정최가표체조건,병용Westem-blot검측중조단백적생물활성.[결과]대장간균BL21(DE3)재37℃배양2.25h후,첨가종농도위2.0 mmol/L적IPTG,27℃배양8 h,Hexon중조단백표체량최고(1.67mg/mL),소표체적중조단백능여견전염성간염양성혈청상결합.[결론]재고농도IPTG유도화랭배양조건하,Hexon단백기인적표체량최고,표체출적중조단백구유흔호적반응원성,위진일보연구륙린체단백적작용궤리급아단위역묘적연구제공료실험기출.
