生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
5期
730-735
,共6页
王清路%张锐%倪万潮%陈毓荃%郭三堆
王清路%張銳%倪萬潮%陳毓荃%郭三堆
왕청로%장예%예만조%진육전%곽삼퇴
毕赤酵母%分泌型表达载体%腈水解酶%透明颤菌血红蛋白
畢赤酵母%分泌型錶達載體%腈水解酶%透明顫菌血紅蛋白
필적효모%분비형표체재체%정수해매%투명전균혈홍단백
为获得高效表达外源蛋白的Pichia pastoris菌株而设计了重组质粒pPIC9K-vgbbxn,其中透明颤菌血红蛋白基因vgb胞内表达以提高菌体的发酵密度,腈水解酶基因bxn分泌表达.转化GS115菌株后,通过PCR、SDS-PAGE检测证实两基因已经整合进酵母基因组且能高效表达,以及用准确的蛋白活性测定方法成功地检测到二者所表达的产物均具有正常的活性.摇瓶发酵实验证明,血红蛋白在贫氧条件下可明显促进酵母菌体生长和bxn基因分泌表达.
為穫得高效錶達外源蛋白的Pichia pastoris菌株而設計瞭重組質粒pPIC9K-vgbbxn,其中透明顫菌血紅蛋白基因vgb胞內錶達以提高菌體的髮酵密度,腈水解酶基因bxn分泌錶達.轉化GS115菌株後,通過PCR、SDS-PAGE檢測證實兩基因已經整閤進酵母基因組且能高效錶達,以及用準確的蛋白活性測定方法成功地檢測到二者所錶達的產物均具有正常的活性.搖瓶髮酵實驗證明,血紅蛋白在貧氧條件下可明顯促進酵母菌體生長和bxn基因分泌錶達.
위획득고효표체외원단백적Pichia pastoris균주이설계료중조질립pPIC9K-vgbbxn,기중투명전균혈홍단백기인vgb포내표체이제고균체적발효밀도,정수해매기인bxn분비표체.전화GS115균주후,통과PCR、SDS-PAGE검측증실량기인이경정합진효모기인조차능고효표체,이급용준학적단백활성측정방법성공지검측도이자소표체적산물균구유정상적활성.요병발효실험증명,혈홍단백재빈양조건하가명현촉진효모균체생장화bxn기인분비표체.
