实用肿瘤学杂志
實用腫瘤學雜誌
실용종류학잡지
JOURNAL OF PRACTICAL ONCOLOGY
2005年
4期
260-263
,共4页
孙运祥%任丽君%郭玉嵩%田长富
孫運祥%任麗君%郭玉嵩%田長富
손운상%임려군%곽옥숭%전장부
白细胞介素2%腺病毒载体%同源重组
白細胞介素2%腺病毒載體%同源重組
백세포개소2%선병독재체%동원중조
目的 构建含hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒.方法将hIL-2 DNA片段与载体pDNR-Dual-CMV融合,转化大肠杆菌DH5α.得到重组质粒(pDNR-Dual-hIL-2),经鉴定正确,将pDNR-Dual-hIL-2质粒与pLP-Adeno-x-CMV质粒重组得到重组载体pLP-Adeno-hIL-2,再次转化大肠杆菌DH5α,挑取正确克隆,大量扩增,提取质粒.将此质粒经PacⅠ酶切后与LipofectamineTM 2000转染HEK293细胞,产生含人IL-2的复制缺陷重组腺病毒(AdhIL-2).结果 pLP-Adeno-hIL-2重组载体经PCR、酶切鉴定结果与预期相符,所得重组病毒滴度达到5×107 PFU/ml.结论成功构建了hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒.
目的 構建含hIL-2的複製缺陷型重組腺病毒.方法將hIL-2 DNA片段與載體pDNR-Dual-CMV融閤,轉化大腸桿菌DH5α.得到重組質粒(pDNR-Dual-hIL-2),經鑒定正確,將pDNR-Dual-hIL-2質粒與pLP-Adeno-x-CMV質粒重組得到重組載體pLP-Adeno-hIL-2,再次轉化大腸桿菌DH5α,挑取正確剋隆,大量擴增,提取質粒.將此質粒經PacⅠ酶切後與LipofectamineTM 2000轉染HEK293細胞,產生含人IL-2的複製缺陷重組腺病毒(AdhIL-2).結果 pLP-Adeno-hIL-2重組載體經PCR、酶切鑒定結果與預期相符,所得重組病毒滴度達到5×107 PFU/ml.結論成功構建瞭hIL-2的複製缺陷型重組腺病毒.
목적 구건함hIL-2적복제결함형중조선병독.방법장hIL-2 DNA편단여재체pDNR-Dual-CMV융합,전화대장간균DH5α.득도중조질립(pDNR-Dual-hIL-2),경감정정학,장pDNR-Dual-hIL-2질립여pLP-Adeno-x-CMV질립중조득도중조재체pLP-Adeno-hIL-2,재차전화대장간균DH5α,도취정학극륭,대량확증,제취질립.장차질립경PacⅠ매절후여LipofectamineTM 2000전염HEK293세포,산생함인IL-2적복제결함중조선병독(AdhIL-2).결과 pLP-Adeno-hIL-2중조재체경PCR、매절감정결과여예기상부,소득중조병독적도체도5×107 PFU/ml.결론성공구건료hIL-2적복제결함형중조선병독.
