西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
5期
18-22,26
,共6页
汪慧蓉%朱宏莉%惠文利%张志锋%陈超%崔亚丽
汪慧蓉%硃宏莉%惠文利%張誌鋒%陳超%崔亞麗
왕혜용%주굉리%혜문리%장지봉%진초%최아려
盐酸克伦特罗%金磁微粒%亲和吸附%抗体纯化
鹽痠剋倫特囉%金磁微粒%親和吸附%抗體純化
염산극륜특라%금자미립%친화흡부%항체순화
以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及抗BSA抗体的效价进行测定,确定最佳纯化条件,得到高纯度的抗CBL抗体.结果表明,通过一步反应,可实现载体蛋白BSA在金磁微粒表面的固定化,每毫克金磁微粒固定BSA的容量可达236μg;在最佳纯化条件(温度4 C,反应时间2 h,金磁微粒表面BSA质量与抗体质量比为7:1)下,金磁微粒-BSA可有效地去除偶联物多克隆抗体中的抗BSA抗体,而纯化前后抗CBL抗体的效价基本保持不变,分离纯化效果较好.该方法可方便、快速地去除多克隆抗体中的无关抗体,对小分子半抗原多克隆抗体的纯化具有重要意义.
以重氮化法製備鹽痠剋倫特囉-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原併免疫傢兔製備多剋隆抗體,將錶麵固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)與多剋隆抗體反應,抗BSA抗體通過抗原抗體反應被吸附在金磁微粒錶麵,磁性分離,利用ELISA法對純化前後抗CBL及抗BSA抗體的效價進行測定,確定最佳純化條件,得到高純度的抗CBL抗體.結果錶明,通過一步反應,可實現載體蛋白BSA在金磁微粒錶麵的固定化,每毫剋金磁微粒固定BSA的容量可達236μg;在最佳純化條件(溫度4 C,反應時間2 h,金磁微粒錶麵BSA質量與抗體質量比為7:1)下,金磁微粒-BSA可有效地去除偶聯物多剋隆抗體中的抗BSA抗體,而純化前後抗CBL抗體的效價基本保持不變,分離純化效果較好.該方法可方便、快速地去除多剋隆抗體中的無關抗體,對小分子半抗原多剋隆抗體的純化具有重要意義.
이중담화법제비염산극륜특라-우혈청백단백(CBL-BSA)항원병면역가토제비다극륭항체,장표면고정유BSA적금자미립(금자미립-BSA)여다극륭항체반응,항BSA항체통과항원항체반응피흡부재금자미립표면,자성분리,이용ELISA법대순화전후항CBL급항BSA항체적효개진행측정,학정최가순화조건,득도고순도적항CBL항체.결과표명,통과일보반응,가실현재체단백BSA재금자미립표면적고정화,매호극금자미립고정BSA적용량가체236μg;재최가순화조건(온도4 C,반응시간2 h,금자미립표면BSA질량여항체질량비위7:1)하,금자미립-BSA가유효지거제우련물다극륭항체중적항BSA항체,이순화전후항CBL항체적효개기본보지불변,분리순화효과교호.해방법가방편、쾌속지거제다극륭항체중적무관항체,대소분자반항원다극륭항체적순화구유중요의의.
