中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
7期
757-761
,共5页
唐梦君%王红宁%周生%徐永莉%余协中%鲜凌瑾
唐夢君%王紅寧%週生%徐永莉%餘協中%鮮凌瑾
당몽군%왕홍저%주생%서영리%여협중%선릉근
禽传染性支气管炎病毒%M基因%IL-18%DNA疫苗
禽傳染性支氣管炎病毒%M基因%IL-18%DNA疫苗
금전염성지기관염병독%M기인%IL-18%DNA역묘
将禽传染性支气管炎病毒(IBV)的M基因和禽白介素18(IL-18)基因分别插入双顺反子质粒plRES-EGFP/DsRed中,构建IBV M和IL-18基因的共表达质粒pIRES-M/IL18及表达M基因的pIRES-M质粒.通过脂质体转染Vero细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测质粒在体外的表达.将构建的质粒用脂质体包裹后,通过腿部肌肉多点注射免疫7日龄雏鸡,28日龄加强免疫1次;免疫前后均采血检测ELISA抗体效价和外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量;二免后2周用IBV肾型强毒进行攻毒.结果显示,pIRES-M/IL-18、pIRES-M质粒均在Vero细胞中有效地转录并表达目的蛋白.从免疫后7 d起,plRES-M/IL18免疫组产生的抗体水平及外周血T淋巴细胞亚群数量均高于pIRES-M组.plRES-M/IL18、pIRES-M组对强毒的攻击保护率分别为65%和40%.以上结果表明,禽源IL-18基因与IBV M基因共表达可增强鸡体对DNA疫苗的免疫应答,提高对IBV强毒的抵抗力.
將禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)的M基因和禽白介素18(IL-18)基因分彆插入雙順反子質粒plRES-EGFP/DsRed中,構建IBV M和IL-18基因的共錶達質粒pIRES-M/IL18及錶達M基因的pIRES-M質粒.通過脂質體轉染Vero細胞,利用RT-PCR及間接免疫熒光檢測質粒在體外的錶達.將構建的質粒用脂質體包裹後,通過腿部肌肉多點註射免疫7日齡雛鷄,28日齡加彊免疫1次;免疫前後均採血檢測ELISA抗體效價和外週血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞的數量;二免後2週用IBV腎型彊毒進行攻毒.結果顯示,pIRES-M/IL-18、pIRES-M質粒均在Vero細胞中有效地轉錄併錶達目的蛋白.從免疫後7 d起,plRES-M/IL18免疫組產生的抗體水平及外週血T淋巴細胞亞群數量均高于pIRES-M組.plRES-M/IL18、pIRES-M組對彊毒的攻擊保護率分彆為65%和40%.以上結果錶明,禽源IL-18基因與IBV M基因共錶達可增彊鷄體對DNA疫苗的免疫應答,提高對IBV彊毒的牴抗力.
장금전염성지기관염병독(IBV)적M기인화금백개소18(IL-18)기인분별삽입쌍순반자질립plRES-EGFP/DsRed중,구건IBV M화IL-18기인적공표체질립pIRES-M/IL18급표체M기인적pIRES-M질립.통과지질체전염Vero세포,이용RT-PCR급간접면역형광검측질립재체외적표체.장구건적질립용지질체포과후,통과퇴부기육다점주사면역7일령추계,28일령가강면역1차;면역전후균채혈검측ELISA항체효개화외주혈CD3+、CD4+、CD8+T림파세포적수량;이면후2주용IBV신형강독진행공독.결과현시,pIRES-M/IL-18、pIRES-M질립균재Vero세포중유효지전록병표체목적단백.종면역후7 d기,plRES-M/IL18면역조산생적항체수평급외주혈T림파세포아군수량균고우pIRES-M조.plRES-M/IL18、pIRES-M조대강독적공격보호솔분별위65%화40%.이상결과표명,금원IL-18기인여IBV M기인공표체가증강계체대DNA역묘적면역응답,제고대IBV강독적저항력.
