延边大学农学学报
延邊大學農學學報
연변대학농학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE YANBIAN UNIVERSITY
2009年
1期
16-20,52
,共6页
林下参%基因组DNA%RAPD体系
林下參%基因組DNA%RAPD體繫
림하삼%기인조DNA%RAPD체계
采用改良的CTAB法提取林下参的基因组DNA,所得的DNA纯度高、质量好,可用于RAPD分析.筛选出的林下参RAPD反应的最佳体系为20μL,反应体系中包括模板DNA20ng,引物20pmol,dNTPs 0.1875mmol/L,TaqDNA聚合酶1.5U,Mg2+2.0 mmol/L,10×Reaction Buffer2.0mmol/L ,其余部分用无菌超纯水补充.PCR扩增程序为94℃预变性5min,94℃变性1min,37℃退火1min,72℃延伸2min,40次循环,72℃最终延伸7min.应用优化后的反应体系PCR扩增获得的RAPD指纹图谱带型清晰,重复性好,为通过分子标记获得丰富的林下参遗传信息奠定了基础.
採用改良的CTAB法提取林下參的基因組DNA,所得的DNA純度高、質量好,可用于RAPD分析.篩選齣的林下參RAPD反應的最佳體繫為20μL,反應體繫中包括模闆DNA20ng,引物20pmol,dNTPs 0.1875mmol/L,TaqDNA聚閤酶1.5U,Mg2+2.0 mmol/L,10×Reaction Buffer2.0mmol/L ,其餘部分用無菌超純水補充.PCR擴增程序為94℃預變性5min,94℃變性1min,37℃退火1min,72℃延伸2min,40次循環,72℃最終延伸7min.應用優化後的反應體繫PCR擴增穫得的RAPD指紋圖譜帶型清晰,重複性好,為通過分子標記穫得豐富的林下參遺傳信息奠定瞭基礎.
채용개량적CTAB법제취림하삼적기인조DNA,소득적DNA순도고、질량호,가용우RAPD분석.사선출적림하삼RAPD반응적최가체계위20μL,반응체계중포괄모판DNA20ng,인물20pmol,dNTPs 0.1875mmol/L,TaqDNA취합매1.5U,Mg2+2.0 mmol/L,10×Reaction Buffer2.0mmol/L ,기여부분용무균초순수보충.PCR확증정서위94℃예변성5min,94℃변성1min,37℃퇴화1min,72℃연신2min,40차순배,72℃최종연신7min.응용우화후적반응체계PCR확증획득적RAPD지문도보대형청석,중복성호,위통과분자표기획득봉부적림하삼유전신식전정료기출.
