河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
115-117,121
,共4页
王宇腾%崔波%蒋素华%武思%牛苏燕%叶永忠
王宇騰%崔波%蔣素華%武思%牛囌燕%葉永忠
왕우등%최파%장소화%무사%우소연%협영충
蝴蝶兰%ACC氧化酶%ACC合成酶%融合反义基因%根癌农杆菌
蝴蝶蘭%ACC氧化酶%ACC閤成酶%融閤反義基因%根癌農桿菌
호접란%ACC양화매%ACC합성매%융합반의기인%근암농간균
为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片段以反义的方向插入到中间载体pBI221 CaMV启动子的下游,酶切后获得含有CaMV启动子的ACS和ACO基因的反义融合片段.将此包含启动子的反义融合片段连接到植物表达载体pCAMBIA3301中,获得ACC合成酶基因和ACC氧化酶基因融合的反义表达载体,将构建好的植物表达载体转化农杆菌LBA4404,用于侵染蝴蝶兰原球茎.
為瞭穫得具有超常花期的蝴蝶蘭新品繫,根據已報道的蝴蝶蘭ACC閤成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,設計引物從蝴蝶蘭總RNA中剋隆齣ACS保守區的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2箇基因的剋隆和測序後,將ACS基因片段和ACO基因片段以反義的方嚮插入到中間載體pBI221 CaMV啟動子的下遊,酶切後穫得含有CaMV啟動子的ACS和ACO基因的反義融閤片段.將此包含啟動子的反義融閤片段連接到植物錶達載體pCAMBIA3301中,穫得ACC閤成酶基因和ACC氧化酶基因融閤的反義錶達載體,將構建好的植物錶達載體轉化農桿菌LBA4404,用于侵染蝴蝶蘭原毬莖.
위료획득구유초상화기적호접란신품계,근거이보도적호접란ACC합성매(ACS)기인화ACC양화매(ACO)기인적서렬,설계인물종호접란총RNA중극륭출ACS보수구적461 bp편단화ACO적333 bp편단,완성2개기인적극륭화측서후,장ACS기인편단화ACO기인편단이반의적방향삽입도중간재체pBI221 CaMV계동자적하유,매절후획득함유CaMV계동자적ACS화ACO기인적반의융합편단.장차포함계동자적반의융합편단련접도식물표체재체pCAMBIA3301중,획득ACC합성매기인화ACC양화매기인융합적반의표체재체,장구건호적식물표체재체전화농간균LBA4404,용우침염호접란원구경.
