中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2012年
4期
499-503
,共5页
朱晓骏%孙学华%刘顺庆%李曼%商斌仪%杨婉凤%高月求
硃曉駿%孫學華%劉順慶%李曼%商斌儀%楊婉鳳%高月求
주효준%손학화%류순경%리만%상빈의%양완봉%고월구
灵猫方%HepG2.2. 15细胞%自噬
靈貓方%HepG2.2. 15細胞%自噬
령묘방%HepG2.2. 15세포%자서
目的 研究灵猫方对饥饿诱导HepG2.2.15细胞自噬的作用.方法 选取15只SD大鼠制备灵猫方药物血清,设立厄尔平衡盐缓冲液(Earle's balanced salt solution,EBSS)组、EBSS+空白血清组、EBSS+5倍药物血清组、EBSS+10倍药物血清组及DMEM组,每组3个样本.培养HepG2.2.15细胞1、2、4及6 h,构建pEGFP-N1-LC3B表达载体,转染HepG2.2.15细胞,在荧光显微镜下观察细胞浆中GFP-LC3B分布表达变化,计算点状样GFP-LC3B的细胞数与GFP-LC3B转染HepG2.2.15细胞数比值.透射电镜观察各组HepG2.2.15细胞浆内自噬体.Western Blot检测各组HepG2.2.15细胞LC3BⅡ/Ⅰ比值(microtubule-associated protein 1 light chain 3 betaⅡ/Ⅰ).结果 培养2h时,与EBSS+空白血清组比较,EBSS+5倍药物血清、EBSS+ 10倍药物血清明显抑制GFP-LC3B由散在分布向点状分布改变(P＜0.01),电子透射电镜显示EBSS+5倍药物血清组、EBSS+ 10倍药物血清组抑制自噬体形成,Western Blot检测显示EBSS+ 10倍药物血清组LC3BⅡ/Ⅰ比值较EBSS+空白血清组明显下降(P＜0.01).结论 灵猫方药物血清抑制饥饿诱导HepG2.2.15的自噬.
目的 研究靈貓方對饑餓誘導HepG2.2.15細胞自噬的作用.方法 選取15隻SD大鼠製備靈貓方藥物血清,設立阨爾平衡鹽緩遲液(Earle's balanced salt solution,EBSS)組、EBSS+空白血清組、EBSS+5倍藥物血清組、EBSS+10倍藥物血清組及DMEM組,每組3箇樣本.培養HepG2.2.15細胞1、2、4及6 h,構建pEGFP-N1-LC3B錶達載體,轉染HepG2.2.15細胞,在熒光顯微鏡下觀察細胞漿中GFP-LC3B分佈錶達變化,計算點狀樣GFP-LC3B的細胞數與GFP-LC3B轉染HepG2.2.15細胞數比值.透射電鏡觀察各組HepG2.2.15細胞漿內自噬體.Western Blot檢測各組HepG2.2.15細胞LC3BⅡ/Ⅰ比值(microtubule-associated protein 1 light chain 3 betaⅡ/Ⅰ).結果 培養2h時,與EBSS+空白血清組比較,EBSS+5倍藥物血清、EBSS+ 10倍藥物血清明顯抑製GFP-LC3B由散在分佈嚮點狀分佈改變(P＜0.01),電子透射電鏡顯示EBSS+5倍藥物血清組、EBSS+ 10倍藥物血清組抑製自噬體形成,Western Blot檢測顯示EBSS+ 10倍藥物血清組LC3BⅡ/Ⅰ比值較EBSS+空白血清組明顯下降(P＜0.01).結論 靈貓方藥物血清抑製饑餓誘導HepG2.2.15的自噬.
목적 연구령묘방대기아유도HepG2.2.15세포자서적작용.방법 선취15지SD대서제비령묘방약물혈청,설립액이평형염완충액(Earle's balanced salt solution,EBSS)조、EBSS+공백혈청조、EBSS+5배약물혈청조、EBSS+10배약물혈청조급DMEM조,매조3개양본.배양HepG2.2.15세포1、2、4급6 h,구건pEGFP-N1-LC3B표체재체,전염HepG2.2.15세포,재형광현미경하관찰세포장중GFP-LC3B분포표체변화,계산점상양GFP-LC3B적세포수여GFP-LC3B전염HepG2.2.15세포수비치.투사전경관찰각조HepG2.2.15세포장내자서체.Western Blot검측각조HepG2.2.15세포LC3BⅡ/Ⅰ비치(microtubule-associated protein 1 light chain 3 betaⅡ/Ⅰ).결과 배양2h시,여EBSS+공백혈청조비교,EBSS+5배약물혈청、EBSS+ 10배약물혈청명현억제GFP-LC3B유산재분포향점상분포개변(P＜0.01),전자투사전경현시EBSS+5배약물혈청조、EBSS+ 10배약물혈청조억제자서체형성,Western Blot검측현시EBSS+ 10배약물혈청조LC3BⅡ/Ⅰ비치교EBSS+공백혈청조명현하강(P＜0.01).결론 령묘방약물혈청억제기아유도HepG2.2.15적자서.
