中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
9期
1627-1632
,共6页
郭剑%刘小娟%张国尊%孙慧聪%刘林力%郭金波%刘蕾%姚冬梅%宋梅%张晓岚
郭劍%劉小娟%張國尊%孫慧聰%劉林力%郭金波%劉蕾%姚鼕梅%宋梅%張曉嵐
곽검%류소연%장국존%손혜총%류림력%곽금파%류뢰%요동매%송매%장효람
肝星状细胞%第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因%RNA干扰%细胞增殖%细胞凋亡
肝星狀細胞%第10號染色體缺失的燐痠酶和張力蛋白同源物基因%RNA榦擾%細胞增殖%細胞凋亡
간성상세포%제10호염색체결실적린산매화장력단백동원물기인%RNA간우%세포증식%세포조망
目的:探讨腺病毒介导的shRNA下调第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)表达对体外培养的大鼠活化肝星状细胞(HSCs)增殖和凋亡的影响及其信号转导机制.方法:体外培养活化HSCs,以腺病毒为载体将靶向PTEN的shRNA干扰重组体转染至体外活化的大鼠HSCs;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HSCs增殖;末端转移酶标记技术(TUNEL)及流式细胞术测定HSCs凋亡;Western blotting方法检测PTEN、Bax、Bcl-2、Akt、p-Akt、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达情况;实时荧光定量PCR方法检测PTEN、Akt及ERK1 mRNA表达情况.结果:(1) 靶向PTEN的RNA干扰重组腺病毒成功感染体外活化HSCs,并在一定范围内呈时间依赖性地促进HSCs增殖,腺病毒感染HSCs后72 h,HSCs凋亡率显著下降(P<0.05);(2) Bax表达降低,Bcl-2表达增加(P<0.05);(3) p-Akt和p-ERK1/2蛋白表达显著增加(P<0.05);而Akt蛋白及其mRNA、ERK1蛋白及其mRNA表达均无显著改变(P>0.05).结论:RNA干扰下调PTEN基因表达可能通过Bcl-2/Bax途径促进体外活化HSCs增殖并抑制其凋亡,此外,RNA干扰下调PTEN基因表达促进p-Akt和p-ERK1/2表达增多,提示PTEN可能通过影响PI3K/Akt和ERK1/2信号通路而在调控HSCs增殖和凋亡中发挥重要作用.
目的:探討腺病毒介導的shRNA下調第10號染色體缺失的燐痠酶和張力蛋白同源物基因(PTEN)錶達對體外培養的大鼠活化肝星狀細胞(HSCs)增殖和凋亡的影響及其信號轉導機製.方法:體外培養活化HSCs,以腺病毒為載體將靶嚮PTEN的shRNA榦擾重組體轉染至體外活化的大鼠HSCs;四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測HSCs增殖;末耑轉移酶標記技術(TUNEL)及流式細胞術測定HSCs凋亡;Western blotting方法檢測PTEN、Bax、Bcl-2、Akt、p-Akt、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白錶達情況;實時熒光定量PCR方法檢測PTEN、Akt及ERK1 mRNA錶達情況.結果:(1) 靶嚮PTEN的RNA榦擾重組腺病毒成功感染體外活化HSCs,併在一定範圍內呈時間依賴性地促進HSCs增殖,腺病毒感染HSCs後72 h,HSCs凋亡率顯著下降(P<0.05);(2) Bax錶達降低,Bcl-2錶達增加(P<0.05);(3) p-Akt和p-ERK1/2蛋白錶達顯著增加(P<0.05);而Akt蛋白及其mRNA、ERK1蛋白及其mRNA錶達均無顯著改變(P>0.05).結論:RNA榦擾下調PTEN基因錶達可能通過Bcl-2/Bax途徑促進體外活化HSCs增殖併抑製其凋亡,此外,RNA榦擾下調PTEN基因錶達促進p-Akt和p-ERK1/2錶達增多,提示PTEN可能通過影響PI3K/Akt和ERK1/2信號通路而在調控HSCs增殖和凋亡中髮揮重要作用.
목적:탐토선병독개도적shRNA하조제10호염색체결실적린산매화장력단백동원물기인(PTEN)표체대체외배양적대서활화간성상세포(HSCs)증식화조망적영향급기신호전도궤제.방법:체외배양활화HSCs,이선병독위재체장파향PTEN적shRNA간우중조체전염지체외활화적대서HSCs;사갑기우담서염(MTT)법검측HSCs증식;말단전이매표기기술(TUNEL)급류식세포술측정HSCs조망;Western blotting방법검측PTEN、Bax、Bcl-2、Akt、p-Akt、ERK1/2급p-ERK1/2단백표체정황;실시형광정량PCR방법검측PTEN、Akt급ERK1 mRNA표체정황.결과:(1) 파향PTEN적RNA간우중조선병독성공감염체외활화HSCs,병재일정범위내정시간의뢰성지촉진HSCs증식,선병독감염HSCs후72 h,HSCs조망솔현저하강(P<0.05);(2) Bax표체강저,Bcl-2표체증가(P<0.05);(3) p-Akt화p-ERK1/2단백표체현저증가(P<0.05);이Akt단백급기mRNA、ERK1단백급기mRNA표체균무현저개변(P>0.05).결론:RNA간우하조PTEN기인표체가능통과Bcl-2/Bax도경촉진체외활화HSCs증식병억제기조망,차외,RNA간우하조PTEN기인표체촉진p-Akt화p-ERK1/2표체증다,제시PTEN가능통과영향PI3K/Akt화ERK1/2신호통로이재조공HSCs증식화조망중발휘중요작용.
