南开大学学报（自然科学版）
南開大學學報（自然科學版）
남개대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)
2004年
3期
120-124
,共5页
叶丽虹%秦宵然%张晓东%王洪辉%蒋斯明%王长晔%吴晶辉%朱惠芳%赵轼轩%蔡兵
葉麗虹%秦宵然%張曉東%王洪輝%蔣斯明%王長曄%吳晶輝%硃惠芳%趙軾軒%蔡兵
협려홍%진소연%장효동%왕홍휘%장사명%왕장엽%오정휘%주혜방%조식헌%채병
肝癌%肿瘤转移%SCID鼠%细胞系%染色体%癌基因
肝癌%腫瘤轉移%SCID鼠%細胞繫%染色體%癌基因
간암%종류전이%SCID서%세포계%염색체%암기인
本研究应用人肝癌细胞SCID鼠转移模型,筛选和建立肝癌转移细胞系,旨在为肝癌转移研究提供实验材料.采用人肝癌细胞H7402,腋后背部皮下接种SCID鼠,接种后66天时,在荷瘤鼠羸弱时引颈处死,取其肺组织,进行原代细胞培养和传代培养,获得肝癌细胞H7402的亚细胞克隆,命名为M-H7402.然后,对M-H7402细胞进行了生物学鉴定,检测了细胞形态、染色体、细胞动力学、细胞周期、甲胎蛋白表达、癌基因表达和转移相关基因表达等指标.结果显示,M-H7402细胞的生长、增殖和形态等与亲本细胞H7402十分相近,其染色体形态仍为人类核型,众数维持在72～80之间,占75.0%.RT-PCR检测结果显示,M-H7402细胞甲胎蛋白表达为阳性.Western blot检测结果显示,与亲本细胞H-7402相比,癌基因C-myc表达水平较高,转移抑制基因nm23的表达水平明显下调.从肺组织中获得的肝癌转移细胞系M-H7402,在体外可连续传代培养,细胞形态不变.应用SCID鼠筛选获得的亚细胞克隆,与亲本细胞形成配对关系,可为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料.
本研究應用人肝癌細胞SCID鼠轉移模型,篩選和建立肝癌轉移細胞繫,旨在為肝癌轉移研究提供實驗材料.採用人肝癌細胞H7402,腋後揹部皮下接種SCID鼠,接種後66天時,在荷瘤鼠羸弱時引頸處死,取其肺組織,進行原代細胞培養和傳代培養,穫得肝癌細胞H7402的亞細胞剋隆,命名為M-H7402.然後,對M-H7402細胞進行瞭生物學鑒定,檢測瞭細胞形態、染色體、細胞動力學、細胞週期、甲胎蛋白錶達、癌基因錶達和轉移相關基因錶達等指標.結果顯示,M-H7402細胞的生長、增殖和形態等與親本細胞H7402十分相近,其染色體形態仍為人類覈型,衆數維持在72～80之間,佔75.0%.RT-PCR檢測結果顯示,M-H7402細胞甲胎蛋白錶達為暘性.Western blot檢測結果顯示,與親本細胞H-7402相比,癌基因C-myc錶達水平較高,轉移抑製基因nm23的錶達水平明顯下調.從肺組織中穫得的肝癌轉移細胞繫M-H7402,在體外可連續傳代培養,細胞形態不變.應用SCID鼠篩選穫得的亞細胞剋隆,與親本細胞形成配對關繫,可為肝癌細胞轉移的研究提供新的實驗材料.
본연구응용인간암세포SCID서전이모형,사선화건립간암전이세포계,지재위간암전이연구제공실험재료.채용인간암세포H7402,액후배부피하접충SCID서,접충후66천시,재하류서리약시인경처사,취기폐조직,진행원대세포배양화전대배양,획득간암세포H7402적아세포극륭,명명위M-H7402.연후,대M-H7402세포진행료생물학감정,검측료세포형태、염색체、세포동역학、세포주기、갑태단백표체、암기인표체화전이상관기인표체등지표.결과현시,M-H7402세포적생장、증식화형태등여친본세포H7402십분상근,기염색체형태잉위인류핵형,음수유지재72～80지간,점75.0%.RT-PCR검측결과현시,M-H7402세포갑태단백표체위양성.Western blot검측결과현시,여친본세포H-7402상비,암기인C-myc표체수평교고,전이억제기인nm23적표체수평명현하조.종폐조직중획득적간암전이세포계M-H7402,재체외가련속전대배양,세포형태불변.응용SCID서사선획득적아세포극륭,여친본세포형성배대관계,가위간암세포전이적연구제공신적실험재료.
