细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
5期
661-662
,共2页
连云宗%李极品%吴玉水%程烽%朱忠勇
連雲宗%李極品%吳玉水%程烽%硃忠勇
련운종%리겁품%오옥수%정봉%주충용
病毒白细胞介素-10%大肠杆菌%表达
病毒白細胞介素-10%大腸桿菌%錶達
병독백세포개소-10%대장간균%표체
目的:构建病毒白细胞介素IL-10(vIL-10)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达.方法: 以EB病毒B95-8细胞培养上清为模板,用PCR扩增EB病毒BCRF1基因.PCR产物经EcoR I和Xho I双酶切后,克隆至原核表达载体pET-28a中,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,在IPTG诱导下表达目的蛋白.结果: 以终浓度为100 靘ol/L的IPTG于30℃诱导6h后,重组菌可高效表达相对分子质量(Mr)约为24 000的His-vIL-10融合蛋白.结论:成功地克隆vIL-10的编码基因并在大肠杆菌中高效表达,为制备抗vIL-10单克隆抗体(mAb)、分析vIL-10结构与功能的关系提供了条件.
目的:構建病毒白細胞介素IL-10(vIL-10)基因的原覈錶達載體併在大腸桿菌中錶達.方法: 以EB病毒B95-8細胞培養上清為模闆,用PCR擴增EB病毒BCRF1基因.PCR產物經EcoR I和Xho I雙酶切後,剋隆至原覈錶達載體pET-28a中,以重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)plysS,在IPTG誘導下錶達目的蛋白.結果: 以終濃度為100 靘ol/L的IPTG于30℃誘導6h後,重組菌可高效錶達相對分子質量(Mr)約為24 000的His-vIL-10融閤蛋白.結論:成功地剋隆vIL-10的編碼基因併在大腸桿菌中高效錶達,為製備抗vIL-10單剋隆抗體(mAb)、分析vIL-10結構與功能的關繫提供瞭條件.
목적:구건병독백세포개소IL-10(vIL-10)기인적원핵표체재체병재대장간균중표체.방법: 이EB병독B95-8세포배양상청위모판,용PCR확증EB병독BCRF1기인.PCR산물경EcoR I화Xho I쌍매절후,극륭지원핵표체재체pET-28a중,이중조질립전화대장간균BL21(DE3)plysS,재IPTG유도하표체목적단백.결과: 이종농도위100 정ol/L적IPTG우30℃유도6h후,중조균가고효표체상대분자질량(Mr)약위24 000적His-vIL-10융합단백.결론:성공지극륭vIL-10적편마기인병재대장간균중고효표체,위제비항vIL-10단극륭항체(mAb)、분석vIL-10결구여공능적관계제공료조건.
