现代免疫学
現代免疫學
현대면역학
CURRENT IMMUNOLOGY
2007年
1期
18-22
,共5页
王雪峰%陈永井%王勤%代群%杨科芳%张学光
王雪峰%陳永井%王勤%代群%楊科芳%張學光
왕설봉%진영정%왕근%대군%양과방%장학광
BTLA%单克隆抗体%共抑制信号%杂交瘤
BTLA%單剋隆抗體%共抑製信號%雜交瘤
BTLA%단극륭항체%공억제신호%잡교류
为了研制鼠抗人BTLA功能性单克隆抗体,以高表达人BTLA分子的基因转染细胞L929/BTLA为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并以基因转染细胞293T/BTLA和293T/mock作为抗原,筛选阳性杂交瘤克隆,经间接免疫荧光标记和流式细胞术分析、反复鉴定和多次克隆化培养,筛选获得分泌特异性鼠抗人BTLA分子单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用Ig亚型快速定性试纸法、细胞核染色体计数、竞争结合抑制试验和T增殖抑制试验等对单抗进行生物学特性的鉴定.结果表明,成功获得一株持续、稳定分泌鼠抗人BTLA单克隆抗体的杂交瘤细胞株8H9,该单抗可特异性识别基因转染细胞以及静止与活化T淋巴细胞上表达的BTLA分子,单抗8H9和BTLA交联后能显著抑制鼠抗人CD3单抗对T细胞激发的增殖作用.
為瞭研製鼠抗人BTLA功能性單剋隆抗體,以高錶達人BTLA分子的基因轉染細胞L929/BTLA為免疫原,常規免疫BALB/c小鼠,採用B淋巴細胞雜交瘤技術進行細胞融閤,併以基因轉染細胞293T/BTLA和293T/mock作為抗原,篩選暘性雜交瘤剋隆,經間接免疫熒光標記和流式細胞術分析、反複鑒定和多次剋隆化培養,篩選穫得分泌特異性鼠抗人BTLA分子單剋隆抗體的雜交瘤細胞株;採用Ig亞型快速定性試紙法、細胞覈染色體計數、競爭結閤抑製試驗和T增殖抑製試驗等對單抗進行生物學特性的鑒定.結果錶明,成功穫得一株持續、穩定分泌鼠抗人BTLA單剋隆抗體的雜交瘤細胞株8H9,該單抗可特異性識彆基因轉染細胞以及靜止與活化T淋巴細胞上錶達的BTLA分子,單抗8H9和BTLA交聯後能顯著抑製鼠抗人CD3單抗對T細胞激髮的增殖作用.
위료연제서항인BTLA공능성단극륭항체,이고표체인BTLA분자적기인전염세포L929/BTLA위면역원,상규면역BALB/c소서,채용B림파세포잡교류기술진행세포융합,병이기인전염세포293T/BTLA화293T/mock작위항원,사선양성잡교류극륭,경간접면역형광표기화류식세포술분석、반복감정화다차극륭화배양,사선획득분비특이성서항인BTLA분자단극륭항체적잡교류세포주;채용Ig아형쾌속정성시지법、세포핵염색체계수、경쟁결합억제시험화T증식억제시험등대단항진행생물학특성적감정.결과표명,성공획득일주지속、은정분비서항인BTLA단극륭항체적잡교류세포주8H9,해단항가특이성식별기인전염세포이급정지여활화T림파세포상표체적BTLA분자,단항8H9화BTLA교련후능현저억제서항인CD3단항대T세포격발적증식작용.
