解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2007年
2期
92-95
,共4页
刘妍%张亮%戴久增%王琳%赵建晴%徐东平
劉妍%張亮%戴久增%王琳%趙建晴%徐東平
류연%장량%대구증%왕림%조건청%서동평
肝炎病毒%乙型%微RNAs%基因表达
肝炎病毒%乙型%微RNAs%基因錶達
간염병독%을형%미RNAs%기인표체
目的 检测乙型肝炎病毒(HBV)全基因组转染对人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞中microRNA(miRNA)表达的影响,为进一步探讨肝细胞中HBV复制的分子生物学机制提供平台.方法 分别提取HepG2.2.15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞,实验组)和其亲本HepG2细胞(对照组)的总RNA并分离miRNA,采用含509条探针的哺乳动物miRNA表达谱芯片对两组之间差异表达的miRNA进行分析.用SAM软件针对差异miRNA筛选的标准为在两组之间荧光强度差异4倍以上,差异miRNA的整体假阳性率为0.选择其中2个miRNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法对芯片结果进行验证.结果 HepG2.2.15细胞与HepG2细胞间差异表达的miRNA共27个(占5.3%),其中7个表达上调,20个表达下调.miR-181d和miR-15a的实时荧光定量RT-PCR验证结果与芯片表达结果基本一致.结论 肝细胞中存在着与HBV复制相关的miRNA,这些上调和下调表达的miRNAs可能参与了HBV在肝细胞中的复制.
目的 檢測乙型肝炎病毒(HBV)全基因組轉染對人肝母細胞瘤細胞繫HepG2細胞中microRNA(miRNA)錶達的影響,為進一步探討肝細胞中HBV複製的分子生物學機製提供平檯.方法 分彆提取HepG2.2.15細胞(轉染HBV全基因組的HepG2細胞,實驗組)和其親本HepG2細胞(對照組)的總RNA併分離miRNA,採用含509條探針的哺乳動物miRNA錶達譜芯片對兩組之間差異錶達的miRNA進行分析.用SAM軟件針對差異miRNA篩選的標準為在兩組之間熒光彊度差異4倍以上,差異miRNA的整體假暘性率為0.選擇其中2箇miRNA,應用實時熒光定量RT-PCR方法對芯片結果進行驗證.結果 HepG2.2.15細胞與HepG2細胞間差異錶達的miRNA共27箇(佔5.3%),其中7箇錶達上調,20箇錶達下調.miR-181d和miR-15a的實時熒光定量RT-PCR驗證結果與芯片錶達結果基本一緻.結論 肝細胞中存在著與HBV複製相關的miRNA,這些上調和下調錶達的miRNAs可能參與瞭HBV在肝細胞中的複製.
목적 검측을형간염병독(HBV)전기인조전염대인간모세포류세포계HepG2세포중microRNA(miRNA)표체적영향,위진일보탐토간세포중HBV복제적분자생물학궤제제공평태.방법 분별제취HepG2.2.15세포(전염HBV전기인조적HepG2세포,실험조)화기친본HepG2세포(대조조)적총RNA병분리miRNA,채용함509조탐침적포유동물miRNA표체보심편대량조지간차이표체적miRNA진행분석.용SAM연건침대차이miRNA사선적표준위재량조지간형광강도차이4배이상,차이miRNA적정체가양성솔위0.선택기중2개miRNA,응용실시형광정량RT-PCR방법대심편결과진행험증.결과 HepG2.2.15세포여HepG2세포간차이표체적miRNA공27개(점5.3%),기중7개표체상조,20개표체하조.miR-181d화miR-15a적실시형광정량RT-PCR험증결과여심편표체결과기본일치.결론 간세포중존재착여HBV복제상관적miRNA,저사상조화하조표체적miRNAs가능삼여료HBV재간세포중적복제.
