中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2008年
1期
68-72
,共5页
程敏%冯琼%钱淑文%高慧%朱粹青
程敏%馮瓊%錢淑文%高慧%硃粹青
정민%풍경%전숙문%고혜%주수청
β淀粉样蛋白%调心方%乳酸脱氢酶%老年性痴呆
β澱粉樣蛋白%調心方%乳痠脫氫酶%老年性癡呆
β정분양단백%조심방%유산탈경매%노년성치태
目的:探讨调心方中是否具有通过结合β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)而减少其神经元毒性的成分.方法:调心方提取物与Aβ共同沉淀并对沉淀物中的Aβ进行免疫印迹检测,制备小量Affi-gel-Aβ,用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测调心方中Affi-gel-Aβ结合组分;大鼠原代皮层神经元培养,以乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)测定法反映细胞损害程度.结果:免疫印迹检测显示Aβ能与调心方中的成分一起沉淀,且沉淀中的Aβ会随调心方的稀释而减少;调心方与Affi-gel-Aβ反应后,用甘氨酸液(pH 2.5)洗脱的组分中有可被HPLC荧光检测器所检测的物质.LDH漏出检测结果显示,在无血清和含血清的培养体系中5 μmol/L Aβ<,1-42>处理48 h均可导致原代培养神经元损害,LDH漏出率显著增加(P<0.01),而大鼠调心方药物血清可抑制Aβ诱导的LDH漏出(P<0.05);经Affi-gel-Aβ吸附的调心方药物血清对Aβ毒性仍有抑制作用(P<0.05),但较经Affi-gel吸附的药物血清有减弱的趋势.结论:调心方中有Aβ结合成分,这类成分不促进Aβ的毒性,而可能具有抑制Aβ毒性的作用.提示在对老年性痴呆有效的中药方剂中探寻Aβ结合成分可能是探寻治疗AD药物的一个手段.
目的:探討調心方中是否具有通過結閤β澱粉樣蛋白(β-amyloid protein,Aβ)而減少其神經元毒性的成分.方法:調心方提取物與Aβ共同沉澱併對沉澱物中的Aβ進行免疫印跡檢測,製備小量Affi-gel-Aβ,用高效液相色譜(high-performance liquid chromatography,HPLC)檢測調心方中Affi-gel-Aβ結閤組分;大鼠原代皮層神經元培養,以乳痠脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)測定法反映細胞損害程度.結果:免疫印跡檢測顯示Aβ能與調心方中的成分一起沉澱,且沉澱中的Aβ會隨調心方的稀釋而減少;調心方與Affi-gel-Aβ反應後,用甘氨痠液(pH 2.5)洗脫的組分中有可被HPLC熒光檢測器所檢測的物質.LDH漏齣檢測結果顯示,在無血清和含血清的培養體繫中5 μmol/L Aβ<,1-42>處理48 h均可導緻原代培養神經元損害,LDH漏齣率顯著增加(P<0.01),而大鼠調心方藥物血清可抑製Aβ誘導的LDH漏齣(P<0.05);經Affi-gel-Aβ吸附的調心方藥物血清對Aβ毒性仍有抑製作用(P<0.05),但較經Affi-gel吸附的藥物血清有減弱的趨勢.結論:調心方中有Aβ結閤成分,這類成分不促進Aβ的毒性,而可能具有抑製Aβ毒性的作用.提示在對老年性癡呆有效的中藥方劑中探尋Aβ結閤成分可能是探尋治療AD藥物的一箇手段.
목적:탐토조심방중시부구유통과결합β정분양단백(β-amyloid protein,Aβ)이감소기신경원독성적성분.방법:조심방제취물여Aβ공동침정병대침정물중적Aβ진행면역인적검측,제비소량Affi-gel-Aβ,용고효액상색보(high-performance liquid chromatography,HPLC)검측조심방중Affi-gel-Aβ결합조분;대서원대피층신경원배양,이유산탈경매(lactic dehydrogenase,LDH)측정법반영세포손해정도.결과:면역인적검측현시Aβ능여조심방중적성분일기침정,차침정중적Aβ회수조심방적희석이감소;조심방여Affi-gel-Aβ반응후,용감안산액(pH 2.5)세탈적조분중유가피HPLC형광검측기소검측적물질.LDH루출검측결과현시,재무혈청화함혈청적배양체계중5 μmol/L Aβ<,1-42>처리48 h균가도치원대배양신경원손해,LDH루출솔현저증가(P<0.01),이대서조심방약물혈청가억제Aβ유도적LDH루출(P<0.05);경Affi-gel-Aβ흡부적조심방약물혈청대Aβ독성잉유억제작용(P<0.05),단교경Affi-gel흡부적약물혈청유감약적추세.결론:조심방중유Aβ결합성분,저류성분불촉진Aβ적독성,이가능구유억제Aβ독성적작용.제시재대노년성치태유효적중약방제중탐심Aβ결합성분가능시탐심치료AD약물적일개수단.