大豆科学
大豆科學
대두과학
SOYBEAN SCIENCE
2009年
2期
191-194
,共4页
刘建凤%苏乔%安利佳%冉学忠
劉建鳳%囌喬%安利佳%冉學忠
류건봉%소교%안리가%염학충
大豆%无载体%无选择标记%GUS基因表达框%子房滴注%转化
大豆%無載體%無選擇標記%GUS基因錶達框%子房滴註%轉化
대두%무재체%무선택표기%GUS기인표체광%자방적주%전화
为了验证大豆子房滴注转化方法的可重复性与遗传稳定性,将由报告基因GUS、表达调控序列(35S肩动子,NOS终止子)和T-DNA边界序列3部分组成的基因表达框转入大豆.对T0代转化材料进行GUS组织化学染色分析和PCR检测.结果表明:在检测的340个幼胚中有12个呈GUS阳性,且在180个转化植株中有6个呈PCR阳性同时其叶片也呈GUS阳性,转化率分别为3.53%和3.33%.Smthern杂交表明外源GUS基因表达框以低拷贝的形式整合到大豆基因组中对转基因后代叶片GUS染色、PCR分析及Northern blot检测结果表明外源基因已遗传给了后代,其中S2株系符合盂德尔分离规律.
為瞭驗證大豆子房滴註轉化方法的可重複性與遺傳穩定性,將由報告基因GUS、錶達調控序列(35S肩動子,NOS終止子)和T-DNA邊界序列3部分組成的基因錶達框轉入大豆.對T0代轉化材料進行GUS組織化學染色分析和PCR檢測.結果錶明:在檢測的340箇幼胚中有12箇呈GUS暘性,且在180箇轉化植株中有6箇呈PCR暘性同時其葉片也呈GUS暘性,轉化率分彆為3.53%和3.33%.Smthern雜交錶明外源GUS基因錶達框以低拷貝的形式整閤到大豆基因組中對轉基因後代葉片GUS染色、PCR分析及Northern blot檢測結果錶明外源基因已遺傳給瞭後代,其中S2株繫符閤盂德爾分離規律.
위료험증대두자방적주전화방법적가중복성여유전은정성,장유보고기인GUS、표체조공서렬(35S견동자,NOS종지자)화T-DNA변계서렬3부분조성적기인표체광전입대두.대T0대전화재료진행GUS조직화학염색분석화PCR검측.결과표명:재검측적340개유배중유12개정GUS양성,차재180개전화식주중유6개정PCR양성동시기협편야정GUS양성,전화솔분별위3.53%화3.33%.Smthern잡교표명외원GUS기인표체광이저고패적형식정합도대두기인조중대전기인후대협편GUS염색、PCR분석급Northern blot검측결과표명외원기인이유전급료후대,기중S2주계부합우덕이분리규률.