扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2009年
1期
1-4
,共4页
袁维峰%吴保明%张鑫宇%张泉%孙怀昌
袁維峰%吳保明%張鑫宇%張泉%孫懷昌
원유봉%오보명%장흠우%장천%손부창
鸡%法氏囊组织%cDNA表达文库%鸡传染性法氏囊病毒
鷄%法氏囊組織%cDNA錶達文庫%鷄傳染性法氏囊病毒
계%법씨낭조직%cDNA표체문고%계전염성법씨낭병독
为构建鸡法氏囊组织互补DNA(cDNA)文库,从3周龄鸡法氏囊组织提取总RNA,用偶联oligo(dT)磁珠纯化mRNA,用SMART(Switching methanism at 5'end of RNA transcrip)技术合成cDNA第1链,用LD-PCR方法扩增双链cDNA.经Sfi Ⅰ酶切消化后,用CHROMA SPIN-400柱去除400 bp以下小片段,获得的双链cDNA与同样酶切的pMyr表达载体连接,电转化大肠杆菌获得cDNA文库.初始文库容量为2.8×106cfu,重组子比例为100%,插入片段的大小平均为1.2 kb.扩增后文库容量为8×1011cfu·mL-1.所建文库为鸡传染性法氏囊病毒受体基因克隆及功能研究奠定基础.
為構建鷄法氏囊組織互補DNA(cDNA)文庫,從3週齡鷄法氏囊組織提取總RNA,用偶聯oligo(dT)磁珠純化mRNA,用SMART(Switching methanism at 5'end of RNA transcrip)技術閤成cDNA第1鏈,用LD-PCR方法擴增雙鏈cDNA.經Sfi Ⅰ酶切消化後,用CHROMA SPIN-400柱去除400 bp以下小片段,穫得的雙鏈cDNA與同樣酶切的pMyr錶達載體連接,電轉化大腸桿菌穫得cDNA文庫.初始文庫容量為2.8×106cfu,重組子比例為100%,插入片段的大小平均為1.2 kb.擴增後文庫容量為8×1011cfu·mL-1.所建文庫為鷄傳染性法氏囊病毒受體基因剋隆及功能研究奠定基礎.
위구건계법씨낭조직호보DNA(cDNA)문고,종3주령계법씨낭조직제취총RNA,용우련oligo(dT)자주순화mRNA,용SMART(Switching methanism at 5'end of RNA transcrip)기술합성cDNA제1련,용LD-PCR방법확증쌍련cDNA.경Sfi Ⅰ매절소화후,용CHROMA SPIN-400주거제400 bp이하소편단,획득적쌍련cDNA여동양매절적pMyr표체재체련접,전전화대장간균획득cDNA문고.초시문고용량위2.8×106cfu,중조자비례위100%,삽입편단적대소평균위1.2 kb.확증후문고용량위8×1011cfu·mL-1.소건문고위계전염성법씨낭병독수체기인극륭급공능연구전정기출.
