南昌大学学报（理科版）
南昌大學學報（理科版）
남창대학학보（이과판）
JOURNAL OF NANCHANG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2009年
3期
298-301
,共4页
篦子三尖杉%ISSR%正交设计%PCR
篦子三尖杉%ISSR%正交設計%PCR
비자삼첨삼%ISSR%정교설계%PCR
Cephalotaxus oliveri%ISSR%orthogonal design%PCR
采用正交设计法研究适合篦子三尖杉(Cephalotaxus oliveri)的ISSR-PCR反应体系,对影响ISSR-PCR的模板、引物、Mg2+、dNTP、Taq酶等5个因素进行了优化.确定了篦子三尖杉ISSR-PCR扩增的最佳体系,即20 μl的反应体系中包括:1 μl 10×PCRbuffer、2.5 mmol/LMg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.25mol/L的ISSR引物、1.5UTaq DNA聚合酶、50 ng模板DNA.运用优化的体系对江西武功山篦子三尖杉总DNA进行ISSR-PCR扩增,获得较好效果.
採用正交設計法研究適閤篦子三尖杉(Cephalotaxus oliveri)的ISSR-PCR反應體繫,對影響ISSR-PCR的模闆、引物、Mg2+、dNTP、Taq酶等5箇因素進行瞭優化.確定瞭篦子三尖杉ISSR-PCR擴增的最佳體繫,即20 μl的反應體繫中包括:1 μl 10×PCRbuffer、2.5 mmol/LMg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.25mol/L的ISSR引物、1.5UTaq DNA聚閤酶、50 ng模闆DNA.運用優化的體繫對江西武功山篦子三尖杉總DNA進行ISSR-PCR擴增,穫得較好效果.
채용정교설계법연구괄합비자삼첨삼(Cephalotaxus oliveri)적ISSR-PCR반응체계,대영향ISSR-PCR적모판、인물、Mg2+、dNTP、Taq매등5개인소진행료우화.학정료비자삼첨삼ISSR-PCR확증적최가체계,즉20 μl적반응체계중포괄:1 μl 10×PCRbuffer、2.5 mmol/LMg2+、0.2 mmol/L dNTPs、0.25mol/L적ISSR인물、1.5UTaq DNA취합매、50 ng모판DNA.운용우화적체계대강서무공산비자삼첨삼총DNA진행ISSR-PCR확증,획득교호효과.
The orthogonal design was used to optimize ISSR-PCR amplification system,such as DNA template,primers,concentration of Mg2+,dNTPs and Taq DNA polymerase were investigated to optimized the ISSR-PCR reaction system of Cephalotaxus oliveri. A sutable ISSR-PCR reaction system was established,namely 20 lreaction system contaning:1 μl10×PCRbuffer 2.5mmol/LMg2+,0.2 mmol/L dNTPs,0.25μmol/L Primer,1.5U TaqDNA polymerase,50ngDNA.The optimized system laid the groundwork for ISSR molecular analysis of of Cephalotaxus oliveri.
